Comment mener une électrophorèse Lab Gel

September 9

En biologie, l'électrophorèse sur gel est l'un des moyens les plus faciles à séparer et analyser l'ADN, l'ARN ou les protéines. L'échantillon à analyser est souvent préparée avant d'effectuer l'électrophorèse. Le gel le plus couramment utilisé pour l'ADN ou de l'ARN est agarose, tandis que l'électrophorèse des protéines utilise souvent des gels de polyacrylamide. À la fin de l'expérience, vous aurez des données qui vous donnera les données moléculaires pour l'échantillon testé. Détermination de la taille moléculaire de l'ADN est l'une des raisons les plus courantes pour l'exécution de cette expérience.

Instructions

1 Sur une surface plane, placer le plateau avec le gel préparé horizontalement dans la chambre d'électrophorèse. Verser le tampon d'électrophorèse sur le gel jusqu'à entièrement couvert. Ensuite, utilisez une pipette pour charger le premier puits avec bromophénol colorant bleu. La voie de ce puits sera connu comme la voie de marqueur.

2 Mélanger votre échantillon avec le tampon de charge. Assurez-vous que le mélange est relativement épaisse pour s'assurer que l'échantillon coule au fond de la solution tampon de gel. En utilisant une pipette, mettre une petite goutte dans le reste des puits sur le gel.

3 Placez le couvercle sur la chambre et allumer votre source d'alimentation. De minuscules bulles dans la solution tampon doit être visible pour indiquer un flux de courant approprié.

4 Laisser le courant à fonctionner jusqu'à ce que le colorant dans la voie de marqueur est d'environ 2 cm du bord du gel, puis éteindre la source d'alimentation.

5 Faire tremper le gel au bromure d'éthidium pendant environ 8 minutes. Ensuite, examiner les résultats sous une source de lumière ultraviolette. Vous pouvez utiliser la distance des bandes pour effectuer des calculs relatifs à des poids moléculaires ou d'autres informations que vous souhaitez trouver.

Conseils et avertissements

  • Assurez-vous de porter une attention particulière à la position de la bande de marqueur pour empêcher l'électrophorèse d'aller trop longtemps et ruiner le results.There est une chance que vous pourriez avoir à exécuter la même expérience quelques fois pour obtenir les résultats que vous voulez. Ne laissez pas cela vous frustrer comme il arrive souvent à tout le monde.
  • Le bromure d'éthidium est très cancérigène. Soyez très prudent lors de la manipulation de ce produit chimique et de ne jamais toucher à mains nues.