CFU signifie unités formant colonie, un terme en microbiologie utilisé pour quantifier le nombre de bactéries sont présentes dans une solution. En fonction de la concentration de votre échantillon, vous devrez effectuer des dilutions multiples et plaque les différents échantillons sur des boîtes de Pétri. S'il y a trop de colonies bactériennes, ils seront difficiles à compter, et s'il y a trop peu, l'échantillon ne sont pas représentatives. Il est généralement une bonne idée de plaquer la solution originale, puis une dilution 1/10 (1 solution partielle, 9 parties salines), une dilution 1/100 et éventuellement une dilution 1/1000.
Instructions
Calcul CFU de Dilution bactérienne
1 Effectuer un décompte préliminaire de chaque plat une fois que les bactéries ont eu le temps d'incubation, habituellement un ou deux jours. Vous voulez compter que des colonies individuelles, qui doivent être distincts, des points isolés, et non pas toute une blob de différentes colonies grandi ensemble. Choisissez la plaque qui a plus de 30 de ces colonies, mais moins de 300.
2 Compter le nombre de colonies individuelles. Ceci est le nombre de CFU de votre dilution - vous devrez effectuer un calcul simple pour déterminer l'UFC de l'échantillon initial. Dans cet exemple, une plaque hypothétique contenant 46 colonies sera utilisé.
3 Déterminer la taille de la dilution que vous avez utilisé. Idéalement, vous avez étiqueté les boîtes de Pétri à l'avance. Pour cet exemple, vous pouvez mélanger 1 ml de culture bactérienne avec 99 ml de solution saline. Ceci est une dilution au 1/100.
4 Multipliez le degré de la dilution par le montant que vous avez effectivement plaqué. Si, dans cet exemple, vous plaqué 0,1 mL de votre dilution 1/100 sur la gélose, vous multipliez 0,1 x 1/100, pour un résultat de 1/1000 ou 0,001.
5 Divisez la CFU de la dilution (le nombre de colonies que vous avez compté) par le résultat de l'étape 4. Pour cet exemple, vous divisez 46 par 1/1000, qui est le même que la multiplication par 1000. Le résultat est 46 000 UFC dans l'échantillon d'origine.