Un spectrophotomètre est un instrument complexe utilisé par le laboratoire et les médecins légistes pour identifier la composition chimique des substances inconnues. Spectrophotomètres fonctionnent en mesurant l'absorption des molécules dans une substance. Cependant, les spectrophotomètres peuvent également être utilisés pour mesurer des paramètres de qualité de l'eau tels que le pH.
Instructions
Préparer les solutions inconnues et connues pour la mesure
1 Porter des lunettes de sécurité et des gants. Pipet 10 mL indicateur vert de bromocrésol dans une fiole jaugée de 50. Utilisez un cylindre gradué pour ajouter 25 ml de la solution avec le pH inconnu et le diluer à la marque 50 ml avec de l'eau déminéralisée.
2 Pipet 10 mL indicateur vert de bromocrésol dans une seconde fiole jaugée 50. Utilisez un cylindre gradué pour ajouter 25 ml de solution 0,1 M HCl et le diluer à la marque 50 ml avec de l'eau déminéralisée.
3 Pipet 10 mL indicateur vert de bromocrésol dans une troisième fiole jaugée de 50. Utilisez un cylindre gradué pour ajouter 25 ml de la solution 0,1 M NaOH et le diluer à la marque 50 ml avec de l'eau déminéralisée. Vous avez maintenant trois 50 ml fioles jaugées séparés contenant trois solutions sur mesure.
Établir Eau désionisée Baseline
4 Rincer la cuvette avec de l'eau du robinet et le rincer à nouveau avec de l'eau déminéralisée.
5 Remplir la cuvette avec de l'eau déminéralisée et le mettre de côté dans un support.
6 Utilisez le spectrophotomètre pour mesurer les spectres de l'eau déminéralisée. Cela établit une base de comparaison des spectres.
Mesurer la Spectra des solutions inconnues et connues
7 En utilisant la solution d'échantillon inconnu dans la première fiole jaugée 50, rincer la cuvette deux fois, puis le remplir avec une solution. Placer la cuvette dans le support et de mesurer et d'enregistrer le spectre de l'échantillon inconnu.
8 En utilisant la solution de HCl dans la seconde fiole jaugée 50, rincer la cuvette deux fois, puis le remplir avec une solution. Placer la cuvette dans le support et mesurer et enregistrer le spectre de la solution de HCl.
9 En utilisant la solution de NaOH dans la troisième fiole jaugée 50, rincer la cuvette deux fois, puis le remplir avec une solution. Placer la cuvette dans le support et mesurer et enregistrer le spectre de la solution de NaOH.
Calcul du pH de l'échantillon inconnu
dix Dans Excel ou à la main, saisissez les absorbances et pH des deux échantillons connus dans un tableau comme suit:
le pH de NaOH pH de HCl
l'absorbance de NaOH absorption de HCl
11 Ajouter une ligne à la table pour calculer le journal des valeurs d'absorbance pour les solutions de NaOH et HCl:
le pH de NaOH pH de HCl
l'absorbance de NaOH absorption de HCl
log (absorbance de NaOH) log (absorbance de HCl)
12 Graphiquement les valeurs de pH vs log (absorbance) pour les échantillons connus de solution de NaOH et une solution de HCl. Placer les données du pH sur l'axe des x et le log (absorbance) les données sur l'axe des ordonnées. Tracez une ligne à travers les deux points pour établir la relation linéaire.
13 Etant donné que l'absorbance de l'échantillon inconnu a été mesurée, calculer le logarithme de l'absorbance de l'échantillon inconnu.
14 Tracer la valeur du log de l'absorbance de l'échantillon inconnu comme un point sur l'axe Y du graphique, et tracer une ligne horizontale jusqu'à ce qu'il intercepte le graphique linéaire. Ensuite, dessinez une ligne verticale à l'axe des x et lire la valeur du pH de l'échantillon inconnu.
Conseils et avertissements
- En utilisant un pH-mètre numérique pour confirmer les résultats.
- Rincer la cuvette bien entre la lecture de l'absorbance de différents échantillons.
- Toujours porter l'équipement de sécurité de protection tels que des lunettes et des gants lorsque vous travaillez dans un laboratoire.
- Évitez de toucher la pointe de la cuvette à votre doigt parce que les huiles sur votre peau pourrait introduire une erreur dans la mesure.