Les enzymes sont des protéines qui catalysent des réactions biochimiques. Une enzyme interagit avec une molécule, généralement appelé un substrat, et le transforme en un produit. La vitesse de la réaction dépend de la concentration du substrat ([S]). Mais à une certaine concentration, la vitesse atteint la valeur maximale (Vmax). Km est une constante de Michaelis qui est la concentration du substrat à laquelle la vitesse de réaction est la moitié de la valeur maximale. Km peut être calculée à partir du tracé de Lineweaver-Burk 1 / V = (1 / Vmax) + (Km / Vmax) x 1 / (voir la figure) [S]. De ce graphique, les données expérimentales représentées par des points noirs sont représentés graphiquement en utilisant les coordonnées suivantes: la concentration du substrat réciproque (1 / [S]) et la vitesse de réaction réciproque (1 / V).
Instructions
1 Obtenir une équation représentant le tracé de Lineweaver-Burk. Par exemple, il est
1 / V = 240,5 + 577,2 x 1 / [S].
2 Diviser 1 par le premier coefficient dans l'équation de l'étape 1 pour calculer la vitesse maximale (Vmax). Dans notre exemple, Vmax est 1 / 240,5 = 0,0042.
3 Multipliez le second coefficient dans l'équation de l'étape 1 par Vmax pour calculer la constante de Michaelis Km. Dans notre exemple, Km = 0,0042 x 577,2 = 2,42.