Guide de solvant HPLC

March 18

Guide de solvant HPLC


Les scientifiques utilisent HPLC (chromatographie en phase liquide à haute performance) des systèmes pour identifier des solutions ou déterminer la concentration d'une molécule dans une solution. Les solvants sont une composante clé pour atteindre de bons résultats.

Fonction

La phase mobile d'un système HPLC est un liquide qui se trouve en permanence dans le système HPLC. La phase mobile est constituée de solvants non polaires et d'autres ingrédients tels que des sels ou une solution tampon. Après qu'un échantillon est injecté dans l'HPLC, le solvant (phase mobile) transporte l'échantillon le long d'une colonne (phase stationnaire). La combinaison de la masse moléculaire et de la polarité, la composition chimique du solvant et des interactions avec la colonne (un tube en métal ou en verre garnie de silice) produire un chromatogramme.

Caractéristiques

La phase mobile est le plus souvent une combinaison de qualité HPLC (ultrapur) de l'eau et un solvant organique tel que le méthanol ou l'acétonitrile. Une petite quantité d'acide (0.1%) est ajouté pour améliorer la forme du pic sur le chromatogramme produit par HPLC. Les solvants sont notés sur l'indice Polarité Snyder pour la polarité et d'autres propriétés.

Considérations

compatibilité Polarity est la clé lors du choix des solvants pour votre phase mobile. Si la polarité du solvant est trop élevée, le pic d'échantillon est perdu au milieu du bruit provoqué par le front de solvant tôt dans le chromatogramme. Si la polarité du solvant est trop faible, le temps de rétention de l'échantillon est longue et cela peut se traduire par un petit pic.