Inconvénients immunohistochimie

April 19

Inconvénients immunohistochimie


Immunohistochimie ou IHC, a été utilisé dans la communauté scientifique depuis 1941. Il exploite la spécificité de liaison à des antigènes spécifiques de tissus anticorps; la méthode a toujours été utilisée pour aider à identifier et diagnostiquer les populations de cellules tumorales. aspects désavantageux de IHC ont tendance à provenir de son manque de spécificité, de la difficulté d'interprétation et un faible pourcentage de reproductibilité.

Photobleaching

Photoblanchiment se produit lorsque les colorants fluorescents utilisés dans IHC se dégradent en raison de la surexposition. Les radicaux oxygène, qui résultent de la photochimie de fluorescence, réagissent avec les colorants et éventuellement les détruire. Lors de la visualisation IHC préparé des diapositives par microscopie confocale, le laser à haute intensité peut rapidement rendre les marqueurs fluorescents sur la lame inutilisable après quelques visionnements.

Marker infidélité

En raison de la nature en constante évolution des progrès scientifiques, de nombreux marqueurs que l'on croyait être exclusif à certaines maladies peuvent être montré pour être inutiles indicateurs non exclusifs et donc. Par exemple, si l'antigène MIC2 a été pensé pour être spécifique à EWS-TNEP (le sarcome d'Ewing), des études ultérieures ont révélé que d'autres maux innombrables partagent également l'antigène.

Non Spécificité

La non-spécificité se produit lorsque la fluorescence dans un échantillon donné ne se limite pas à un type de cellule spécifique (appelée aussi faux positifs). Non-spécificité de liaison peut non seulement des échantillons de déchets, mais si non détecté, également conduire à une analyse incorrecte marqueur fluorescent.

Nature qualitative de l'analyse

IHC repose sur l'observation qualitative. Afin de conclure quoi que ce soit par IHC, il faut marquer un échantillon manuellement, ce qui implique de décider lequel des cellules dans une diapositive donnée ont une fluorescence, et parfois même les compter à la main. Décider quelles cellules ont une fluorescence peut être particulièrement problématique, car les résultats de notation peuvent varier considérablement en raison de la qualité des colorants utilisés, la longueur de temps les cellules échantillons ont été exposés à la teinture, ainsi que le jugement du buteur. En tant que tel, seule une très faible reproductibilité niveau de notation existe.