la lyse alcaline est un procédé d'extraction d'acide plasmide désoxyribonucléique (ADN) ou acide ribonucléique (ARN) à partir de cellules bactériennes. Il est rapide, fiable et propre et est l'une des techniques les plus couramment utilisées pour obtenir de l'ADN des cellules.
l'ADN plasmidique
Le plasmide ADN est un segment d'ADN qui est indépendant des chromosomes, mais néanmoins capables de se reproduire. Ses fils sont capables de se recombiner ou recuit suivant le chauffage ou la dénaturation et il est cette propriété sur laquelle lyse alcaline dépend.
Méthodologie
Les cellules bactériennes sont lysées - qui est, dissous ou détruits - avec un mélange d'hydroxyde de sodium et le dodécylsulfate de sodium (SDS). Il est cette solution fortement alcaline qui donne le processus de son nom.
Étapes
SDD est un détergent qui crée des trous dans les membranes cellulaires des cellules bactériennes. L'hydroxyde de sodium desserre les parois des cellules, en libérant l'ADN de plasmide qui peut être séparé de l'ADN cellulaire ou chromosomique. L'ADN chromosomique est précipité à partir d'une solution avec de l'acétate de potassium; l'ADN plasmidique reste en solution et on précipite avec de l'isopropanol.