Comment calculer Dead Time sur la colonne LC

March 24

Comment calculer Dead Time sur la colonne LC


La chromatographie est largement utilisé dans le laboratoire de chimie pour déterminer l'identité d'un composé inconnu. Le composé inconnu circule à travers le matériau de garnissage de la colonne et interagit avec les particules. Les interactions entre les particules et les composés dans l'échantillon sont en fonction de leur solubilité dans l'attraction ou à l'autre. Des molécules qui ont pas d'interaction pour les particules de matériau d'emballage sont autorisés à passer à travers le matériau d'emballage sans entrave. Le temps requis pour les molécules de passer à partir du point d'injection dans le système pour le pic maximum d'une molécule non-réactif est le temps mort de la colonne.

Instructions

1 Addition de l'échantillon inconnu avec une petite quantité d'un composé qui est non retenue par le matériau de la colonne. Le composé passe à travers la colonne sans interaction avec la matière de garnissage dans la colonne.

2 Charger la seringue avec environ 20 microlitres d'échantillon et insérer l'aiguille de la seringue dans l'orifice d'injection. Charger la boucle de la vanne d'échantillonnage par la vidange de la seringue dans la valve.

3 Tourner l'instrument de chromatographie et commencer la phase mobile. La phase mobile circule à travers l'appareil et porte l'échantillon à travers la colonne et le détecteur se terminant dans le conteneur de déchets.

4 Activer la soupape, ce qui permet à l'échantillon d'entrer dans la conduite d'écoulement du solvant. Le solvant transporte les composés dans l'échantillon sur la partie supérieure de la colonne et la séparation commence.

5 Surveiller le signal de sortie du détecteur et identifier le premier pic dans le chromatographe. La différence entre le temps d'injection et le maximum du premier pic, représenté par le composé dopés, est le temps mort.

6 Mesurer la distance entre le point d'injection et la hauteur maximum du premier pic. Multipliez la distance par la vitesse du papier ou de l'axe pour trouver le temps mort.