Des courbes d'étalonnage sont utilisées pour déterminer la concentration des substances inconnues à partir de mesures antérieures des solutions de concentrations connues. La précision et la précision des mesures sont dépendantes de la courbe d'étalonnage. La meilleure est la courbe plus précise la réponse, plus la courbe plus la précision. Ce type de méthode de comparaison, l'inconnu est comparé à un connue. Les courbes d'étalonnage sont utilisés pour tous les types de mesures à l'aide de nombreuses machines différentes. Cet exemple utilise un spectrophotomètre.
Instructions
1 Diluer la solution standard à différentes concentrations. Il est typique pour faire une dilution de 10 fois, 20 fois la dilution, la dilution de 30 fois ou une autre solution rationnelle étape. Faites chaque dilution deux fois pour que tous les échantillons sont en double.
2 Calculer les concentrations des solutions diluées. Un exemple de la nouvelle concentration de la dilution de 10 fois serait la concentration de la première solution multipliée par 0,10.
3 Lire l'absorbance des solutions diluées sur le spectrophotomètre. Insérez une cuvette dans le spectrophotomètre de telle sorte que le marquage triangle est aligné avec le trajet de la lumière. Fermez le couvercle du spectrophotomètre et appuyez sur le bouton zéro. Concentrez la machine avec de l'eau distillée tous les cinq échantillons. Une fois que la machine est mise à zéro de lire les échantillons de la même manière. La seule différence est que vous appuyez sur Entrée pour obtenir la capacité d'absorption. Appuyez sur Entrée après la fermeture du couvercle. Notez ces valeurs dans un cahier.
4 Graphiquement l'absorption par rapport aux concentrations connues calculées pour tous les échantillons. La concentration connue sera sur l'axe X et l'absorbance sur l'axe des ordonnées. Il est préférable de créer le graphique dans un programme informatique graphique.
5 Utilisez le programme graphique pour calculer la ligne de régression pour les points Graphed. Il est possible de supprimer l'un des deux points pour chaque dilution pour obtenir la ligne de régression meilleur. Ceci est le point de faire chaque dilution en double exemplaire. Plus la R ^ 2 valeur est l'une, meilleure est la ligne de régression. Prenez note de l'équation de la droite de régression.
6 Lire l'absorbance de la solution de concentration inconnue sur le spectrophotomètre. Enregistrer cette absorption.
7 Calculer la concentration de la solution inconnue en utilisant l'équation de la droite de régression. L'absorbance connue est substitué par Y dans l'équation. Vous résolvez l'équation pour X, la concentration.