Le microscope électronique à transmission ou TEM, est un outil favori des biologistes pour sa capacité à produire des ultra images haute résolution qui microscopes conventionnels ne peuvent pas. Parce que le TEM exige des électrons et des photons non pour créer ses images, il utilise des électroaimants au lieu de lentilles pour concentrer. Le dispositif nécessite des tensions élevées et un vide élevé pour fonctionner, ce qui nécessite des méthodes spéciales pour la préparation des échantillons.
Techniques de montage entières
imagerie TEM nécessite peu d'eau dans l'échantillon parce que l'eau peut causer des électrons d'imagerie à capturer ou dispersés. Cependant, avec en particulier les petites ou minces échantillons, l'ensemble de l'échantillon peut être monté pour la visualisation, à condition qu'il soit rendu visible. coloration positive ajoute les taches à l'échantillon pour le rendre visible, tandis que la coloration négative place l'échantillon des souillures dans un milieu sombre. coloration de l'ombre est utilisé pour exprimer un angle du sujet pour l'imagerie pseudo 3D.
Ultra-minces Techniques de sectionner
Ces techniques peuvent accueillir le besoin du TEM pour les échantillons minces en faisant des tranches minces dans l'échantillon pour l'imagerie plus facile. Ceci peut être accompli de plusieurs façons, principalement par l'incorporation de l'échantillon dans la résine avant de le couper, mais les techniques cryosectioning sont de plus en plus en popularité. Cette utilisé essentiellement un produit chimique pour protéger l'échantillon contre les dommages alors qu'il gèle, puis trancher l'échantillon après pour l'étude. Des enzymes et de l'or colloïdal peut être utilisé pour mettre en évidence des protéines spécifiques.
Méthodes de congélation rapide
Si un échantillon est gelé assez rapidement, l'eau peut être solidifié sans causer de dommages aux structures au sein de l'échantillon, car les cristaux de glace ne sont jamais la possibilité de se former. Il existe un certain nombre de façons, cela peut être accompli. L'échantillon peut être rapidement immergé dans un liquide super-froid, a claqué entre deux sources super-froid, pulvérisé avec un agent de congélation ou même sondé par une aiguille gelée. Cette dernière méthode coupures et fige l'échantillon simultanément.
Congeler la gravure et la réplication Techniques
Lorsque l'échantillon lui-même ne peut pas être étudiée par le TEM directement - habituellement en raison de la teneur en eau ou de maquillage chimique - une copie visuelle de l'échantillon peut parfois être créé. Ce mécanisme consiste à congeler l'échantillon sans tenir compte de la formation de cristaux, fracturer l'échantillon, puis la graver par celle-ci sous un vide poussé lyophilisation. La surface de l'échantillon lyophilisé est ensuite copiée pour l'étude. Cette technique est particulièrement efficace pour produire des images de haute qualité des structures internes.