Depuis l'introduction de molécules fluorescentes comme un outil dans les applications biologiques, les cellules biologiques ont été étudiés dans une toute nouvelle lumière. Les fluorophores peuvent être exprimés sous forme de balises sur des protéines ou des gènes par insertion du segment d'ADN codé d'un fluorophore à côté de l'ADN pour une protéine d'intérêt. Lorsqu'elle est transcrite, ils sont exprimés ensemble, créant ainsi une molécule fluorescente.
protéine fluorescente verte (GFP), un fluorophore naturellement présent dans les méduses, est maintenant aussi commun un produit chimique de laboratoire que l'éthanol pour les laboratoires qui travaillent avec la traduction des gènes et des protéines de transcription. D'autres molécules fluorescentes ont été synthétisés pour un spectre plus large de la collecte de données. Comprendre les bases de la façon d'utiliser un microscope à fluorescence permet aux scientifiques de tirer le meilleur parti des techniques de marquage fluorescent.
Instructions
1 Allumer la lampe au mercure au microscope à fluorescence. Cette lampe prend environ 15 minutes pour se réchauffer.
2 Mettre l'échantillon sur le microscope. Si l'échantillon est sur une lame, centrer la lame sous l'objectif.
3 Trouver l'échantillon à l'aide, de la lumière à spectre complet normal.
4 Tamisez les lumières de la pièce pour une meilleure visibilité de la fluorescence.
5 Changer l'obturateur de la lumière à spectre complet de la lumière provenant de l'ampoule de mercure.
6 Changer le filtre à l'affichage qui vous permet de visualiser la lumière de la longueur d'onde correspondant au spectre d'émission du fluorophore en cours d'examen.
7 Voir l'échantillon en utilisant des objectifs différents et des manipulateurs de scène.
Conseils et avertissements
- Gardez les ampoules au mercure de rechange à portée de main. Exécution des ampoules peut décrocher une expérience.
- Éliminer les ampoules au mercure selon les procédures d'élimination des déchets dangereux.