La réaction en chaîne par polymérase, ou PCR, est une technique utilisée pour faire des copies de l'ADN. Plus précisément, la PCR utilise une enzyme connue comme une polymerase qui ajoute des bases d'ADN individuels à une chaîne croissante d'ADN. La réaction de PCR dépend des amorces, des brins courts d'ADN polymérase doit commencer la reproduction de l'ADN et la matrice d'amorce, un mélange de réactifs et les amorces elles-mêmes. Chaque réaction de PCR doit être un volume total de pas plus de 50 uL.
Instructions
1 Ajouter 2,5 ul de tampon de PCR dans un tube Eppendorf, ainsi que 2,5 pi de dNTP.
2 Ajouter 2 uL (50 pmol) des amorces au tube Eppendorf et 1 ul de MgCl2.
3 Ajouter de l'eau pour atteindre un volume final de 50 uL. Ajouter 1 pmol de l'ADN matrice, ou 1 ul de solution d'ADN, selon la valeur la plus facile à mesurer. Votre matrice amorce est préparée.
4 Répétez les étapes 1 à 3 pour autant de matrices que vous souhaitez préparer.