En 1872, Ferdinand Cohn a découvert la bactérie Bacillus subtilis. Bacillus subtilis se trouve dans l'air, la décomposition de la matière végétale, le sol et l'eau. Il forme un endospores, une couche protectrice extérieure solide, qui le protège des facteurs de stress environnementaux tels que l'exposition chimique, des températures extrêmes et la privation de nutriments. Bacillus subtilis a de nombreuses utilisations, y compris les études génétiques, les applications industrielles et comme fongicide. Il est facilement isolé et cultivé dans le laboratoire.
Instructions
1 Peser les ingrédients de la gélose nutritive en utilisant un ensemble d'échelles de solde. Ajouter l'extrait de boeuf et de peptone à agar pour faire la gélose nutritive. Ces nutriments fournissent un milieu de croissance pour Bacillus subtilis. Placer les ingrédients dans le bol. Placez une tige d'agitation en verre dans le bécher.
2 Couvrir le bécher avec une feuille d'aluminium (côté brillant vers l'intérieur du bécher). Placer le bêcher dans un autoclave.
3 Retirer le bécher de l'autoclave une fois que l'agar est stérilisé. Le délai dépend de l'autoclave que vous utilisez. Porter des gants en autoclave. La solution sera très chaud.
4 Laisser le bécher refroidir. Surveiller attentivement. Si l'agar refroidit trop, il va se solidifier; si elle est trop chaude, la condensation excessive se forme sur le couvercle de la boîte de Pétri.
5 Incorporer l'agar avec la tige d'agitation. Verser dans une boîte de Pétri jusqu'à ce que la gélose couvre seulement le fond du plat. Couvrir le plat de Pétri et laisser la gélose solidifier.
6 Tourner le plat à l'envers et le laisser sécher pendant 48 heures à température ambiante. Ceci élimine l'excès d'eau et réduit la condensation.
7 Remplir un tube d'essai avec 9 ml d'eau stérile à l'aide d'une pipette stérile. Peser 1 gramme de sol en utilisant un ensemble d'échelles de solde. Ajouter au tube à essai. Bien mélanger.
8 Pasteurisez l'échantillon de sol dilué à 80 degrés pendant 15 minutes. Placer l'échantillon sur la gélose.
9 Incuber la gélose à 37 ° C pendant 48 heures.
dix Examinez la boîte de Pétri sous un microscope. Vous devriez être en mesure de voir des colonies de Bacillus subtilis. Les colonies peuvent être terne, ridée et crème au brun.
Conseils et avertissements
- Vous pouvez acheter la gélose nutritive préparée commercialement à partir d'une maison d'alimentation biologique, comme Carolina Biological Supply Company.
- Maintenir des conditions stériles.
- Soyez prudent lorsque vous travaillez avec des bactéries. Lavez-vous les mains fréquemment.