Lorsque vous essayez d'isoler ou de détecter un gène d'intérêt, mini-préparations sont une étape cruciale de précurseur. Suite à ce protocole précisément vous fournir une forme suffisamment pure de l'ADN, prêt pour la réaction en chaîne par polymérase, ou PCR, amplification.
Qu'est-ce qu'un Mini Prep?
Des mini-préparations sont des protocoles standard dans lequel l'ADN d'un échantillon est extrait et purifié à des fins d'isolement d'un ou plusieurs gènes d'intérêt. Un certain nombre de protocoles ont été documentés et testés pour leur efficacité. Toutefois, le protocole que vous souhaitez utiliser dépendra du type d'échantillon.
Procédure pour un protocole Mini Prep
Les convenances d'un certain nombre de protocoles différents dépendent du type et du nombre de spécimens que vous extraire de l'ADN à partir.
L'Université de Floride et de l'Université des protocoles mini-préparation Cornell - orientée vers l'extraction d'ADN à partir de colonies bactériennes - diffèrent dans les solutions utilisées et soit peut-être plus approprié en fonction de l'accès à certains réactifs. Alternativement, vous pouvez utiliser les kits QIAprep Spin Miniprep automatisés pour la purification de l'ADN. Cependant, ceux-ci font chaque extraction plus cher.
Pour l'extraction de l'ADN de Drosophila, le site Berkeley BDGP a un protocole utile pour une mouche rapide de l'ADN génomique de préparation.
Résumé
De nombreux protocoles de mini-prep existent, variant dans les solutions et les réactifs utilisés et leur aspect pratique pour les différents types d'ADN. Assurez-vous que vous avez tous les ingrédients nécessaires avant d'engager un quelconque des protocoles référencés; vous ne voulez pas perdre des spécimens potentiellement utiles et limitées.