Toutes les informations nécessaires pour créer un organisme réside dans son ADN. Une base constituée de sucre, de phosphate et une base d'azote constitue l'ADN. Il existe quatre bases azotées adenine (A), la thymine (T), guanine (G) et la cytosine (C). Chaque base de l'azote toujours des paires avec son homologue. Adénine se jumeler avec la thymine et la cytosine se jumeler avec guanine. Tous les organismes portent les mêmes quatre bases azotées. Ce qui sépare un organisme d'un autre est le nombre de paires de bases, et la séquence de leurs arrangements. Protein donne un organisme sa structure. Un procédé chimique complexe transforme l'ADN en ARN messager (ARNm) et de l'ARNm devient finalement traduit en protéines, ce qui donne à l'organisme, sa structure finale.
ADNr Définition
ADN recombinant (ADNr) est le nom général pour prendre un morceau d'un ADN, et en le combinant avec un autre brin d'ADN. Il aide si vous pensez à ADNr comme ADN chimère. (Une chimère est un monstre antique grec composé de corps d'un lion avec la tête d'une chèvre qui sort de la colonne vertébrale avec un serpent pour la queue.) Quand les scientifiques se combinent deux ou plusieurs brins d'ADN différents, ils sont capables de créer un nouveau volet de ADN. La combinaison de l'ADN de deux organismes différents est le processus recombinant le plus commun.
La production ADNr
Avant de pouvoir comprendre comment identifier ADNr, vous devez avoir une compréhension de la façon dont les scientifiques créent ADNr en premier lieu. Les trois méthodes de production ADNr sont la transformation, la transformation non-bactérienne et phage l'introduction.
Transformation
Dans la transformation, vous insérez un morceau d'ADN sélectionné dans un vecteur, puis vous coupez ce morceau de l'ADN avec une enzyme de restriction. Ensuite, vous utilisez l'ADN ligase pour placer l'insert d'ADN dans le vecteur. Le vecteur est introduit dans une cellule hôte (habituellement E. coli), qui a été spécialement préparé pour prendre l'ADN étranger.
Transformation non bactérienne
Ceci est similaire à la transformation, à l'exception que les cellules hôtes sont d'origine non bactérienne. Soit vous insérez le vecteur par microinjection où l'ADN est insérée directement dans le noyau, ou par biolistique où la haute vitesse micro projectiles bombardent les cellules hôtes jusqu'à ce que l'ADN vecteur est absorbé.
Phage Présentation
L'introduction phagique est le processus de transfection, ce qui équivaut à une transformation. Au lieu d'utiliser une bactérie, vous devez utiliser un phage tels que lambda ou M13.
ADNr identification
Lorsque vous préparez votre vecteur, vous les formater avec un marqueur sélectionnable. Ce marqueur vous et d'autres permettent de distinguer les hôtes transformées avec ADNr à partir d'hôtes non transformées. Le marqueur de sélection le plus souvent utilisé est un marqueur antibiotique. En utilisant un marqueur antibiotique, vous pouvez rapidement identifier les cellules contiennent ADNr parce que l'exposition à certains antibiotiques va tuer une cellule hôte sans ADNr car il ne résiste pas à l'antibiotique. Toutes les cellules qui sont résistantes à l'antibiotique sont celles qui contiennent le vecteur et, par conséquent, l'ADNr.