la temperature et lactivité enzymatique

Est-ce que la température influent sur l'activité enzymatique?

March 1

Est-ce que la température influent sur l'activité enzymatique?


Les enzymes sont des molécules de protéines essentielles à tous les systèmes vivants dans la régulation et l'augmentation de la vitesse des réactions chimiques pour produire des produits spécifiques. Le maintien de l'équilibre correct des enzymes dans un système de vie est essentiel à sa santé et réduit le besoin du système pour l'énergie. L'activité de ces catalyseurs biologiques spécifiques sont affectées par la température de l'environnement.

basses Températures

Est-ce que la température influent sur l'activité enzymatique?

Si la température est trop faible, les enzymes ne peuvent pas activer.

Des températures plus basses signifient que les molécules dans un système vivant se déplacent plus lentement et ont une énergie cinétique inférieure. Molécules doivent entrer en collision pour des réactions de se produire, de sorte que si la température est trop faible et les particules se déplacent lentement, la chance pour une molécule d'enzyme pour entrer en collision avec son substrat (le produit chimique spécifique, il peut réagir avec) est beaucoup plus faible. La température à laquelle une enzyme commence à réagir est appelée "énergie d'activation." A basse température, les réactions enzymatiques se produisent plus lentement, et si la température est trop faible, les réactions peuvent ne pas se produire du tout.

Hautes températures

Est-ce que la température influent sur l'activité enzymatique?

Des températures plus élevées peuvent provoquer des enzymes pour dénaturent.

Des températures plus élevées dans un système vivant signifie que la possibilité pour l'énergie d'activation à atteindre est augmentée en raison de l'énergie cinétique du système est plus grande. un moyen plus grande énergie cinétique plus de collisions sont possibles entre les enzymes et les substrats et la vitesse de réaction augmente d'une enzyme. A des températures très élevées enzymes peuvent «dénaturer», ce qui signifie que la chaleur les fait perdre leur forme d'origine nécessaire pour eux de réagir. Par conséquent, si les températures sont trop élevées, une diminution de la vitesse de réaction se produit en raison des enzymes dénaturants.

Températures optimales

Est-ce que la température influent sur l'activité enzymatique?

Vivre les choses dans les endroits les plus chauds ont des enzymes avec la hausse des énergies d'activation.

La température à laquelle la vitesse maximale de la réaction d'une enzyme se produit est appelée «température optimale» de l'enzyme, et chaque enzyme a une température différente optimale. Les systèmes vivants sont adaptés à leur environnement; une crevette d'Alaska va supporter des températures beaucoup plus froides que les bactéries vivant dans le geyser d'une source d'eau chaude. Les bactéries du geyser ne pourraient pas exister facilement dans les mers froides de l'Alaska parce que non seulement seraient ses enzymes jamais atteindre leur température optimale, mais les enzymes ne peuvent jamais atteindre leur énergie d'activation. A l'inverse, les crevettes d'Alaska ne serait pas très bien vivant dans les sources chaudes parce que leurs enzymes seraient probablement dénaturer et cesser de réagir. Une expérience visant à examiner comment la température affecte l'activité enzymatique se trouve dans les ressources.

Comment écrire un rapport de laboratoire A propos de certains facteurs affectant l'activité enzymatique

January 2

Comment écrire un rapport de laboratoire A propos de certains facteurs affectant l'activité enzymatique


Une enzyme est un composé qui aide la réaction chimique dans une cellule en accélérant la vitesse à laquelle elle se produit. La plupart des réactions chimiques se produiraient trop lentement pour que la cellule fonctionne correctement sans l'enzyme. Chaque enzyme est également une protéine contenue dans tous les organismes vivants. Les enzymes agissent sur des composés appelés substrats. L'enzyme et le substrat concentration, la température et le niveau de pH affectent tous la vitesse de réaction de l'enzyme. Bien que l'enzyme reste inchangée par la réaction chimique, le substrat est modifié de façon permanente. Les scientifiques utilisent des expériences et des équipements complexes comme un spectrophotomètre pour étudier ces changements.

Instructions

1 Rédigez un paragraphe d'introduction. Commencez par expliquer pourquoi vous avez choisi d'étudier la biologie des enzymes et leur implication dans les organismes vivants. Quelle hypothèse avez-vous conçu vos expériences pour tester?

2 Décrire la méthode utilisée pour maintenir l'uniformité. Inclure les méthodes utilisées pour empêcher les contaminants loin des expériences. Quel volume de catalase avez-vous utilisé et quel était le taux d'activité? Quels capteurs avez-vous utilisé pour mesurer le taux d'activité et dans quelles unités? Combien de peroxyde d'hydrogène avez-vous utilisé? Quels ont été les temps d'incubation utilisées pour vos expériences?

3 Notez combien de fois vous ou un membre du personnel recueilli des données. Combien de temps at-il fallu pour les recueillir? Décrire la variable dépendante et comment vous avez mesuré il. Écrire au sujet de l'analyse et la compilation. Quel logiciel avez-vous utilisé?

4 Préparer un graphique de vos données. Étiqueter un axe avec la variable dépendante et l'autre axe de la variable indépendante. espace Proportionnellement les chiffres et tracer les données. Ajouter erreur et gamme de bars.

5 Décrire les résultats de vos expériences. Ne vous contentez pas d'écrire une série de chiffres. Vous devez décrire ce qu'ils signifient. Commencez par la variable indépendante relative à son effet sur la variable dépendante. Au lieu d'écrire à propos de l'activité accrue, note au contraire que l'activité a augmenté de 25 pour cent.

6 Écrivez votre interprétation des résultats de votre expérience. Pour chacun de vos chiffres, écrire un minimum d'un paragraphe décrivant les aspects les plus importants. Pensez à cela comme une expansion sur les résultats au lieu d'un récapitulatif. Elle peut comprendre les tendances générales, les taux d'augmentation ou de diminution de l'activité, des relations mathématiques dans les données ou les pourcentages de changements. Est-ce que ça change d'une façon linéaire?

7 Concluez votre rapport en indiquant si vous avez les données à l'appui de votre hypothèse initiale. Si oui, fournir une preuve de votre position en se référant à vos chiffres. Vous pouvez citer des domaines où vous pouvez améliorer les expériences pour prouver votre hypothèse si vos expériences avaient une marge d'erreur importante.

8 Rédigez un paragraphe sur le sens biologique de votre résultat. Adresse la direction de votre recherche devrait aller ensuite sur la base de ce que vous avez découvert au cours de ce projet.

USB Temperature & Humidity Sensor

February 14

USB Temperature & Humidity Sensor


Enregistreurs de données des données environnementales disques, telles que la température et l'humidité, sur une base continue. Les capteurs avec connectivité USB ont permis ces données pour être plus facilement téléchargées dans un ordinateur pour examiner les tendances de température et d'humidité.

Applications

Il existe de nombreux cas dans lesquels la température et l'humidité doivent être contrôlées pendant une longue période de temps. Les enregistreurs de données sont parfaits pour cette fonction puisque les données est numérique et peut être utilisé pour créer des graphiques et d'en tirer des informations statistiques. Musées, stations météorologiques, les collectionneurs d'antiquités, les amateurs de cigares et d'autres ont besoin de ce type de données.

Les enregistreurs de données USB

Typiquement enregistreurs de données ont des capteurs internes ou externes qui enregistrent et la température de stockage et de l'humidité (entre autres données) sur une base constante. Les premiers enregistreurs de données requis un câble série maladroit pour télécharger des données. capteurs de l'enregistreur de données avec la connectivité USB rendent plus facile et plus pratique pour télécharger des données depuis l'enregistreur peut être branché directement sur l'ordinateur.

exactitude

La précision est en corrélation avec le coût, et les unités USB ont tendance à être moins cher que d'autres types d'enregistreurs de données avec une précision similaire. A pyschrometer (un instrument pour enregistrer la température, le point de rosée et de l'humidité relative) est souvent nécessaire pour obtenir précises température et d'humidité. Les capteurs sur l'enregistreur USB peuvent ensuite être calibrés pour assurer l'exactitude.

Explication simple de Photosynthèse

February 25

Explication simple de Photosynthèse


La photosynthèse est le processus par lequel les plantes et certains organismes unicellulaires produisent des sucres à partir de la lumière du soleil et du dioxyde de carbone. Ces sucres deviennent alors les aliments utilisés dans la respiration cellulaire. Chez les plantes, la photosynthèse se produit dans des structures spécialisées appelées chloroplastes.

Photosynthèse

La réaction globale de la photosynthèse utilise six molécules de dioxyde de carbone et six molécules d'eau pour produire une molécule de sucre (glucose) et six molécules d'oxygène.

Pigments photosynthétiques

pigments photosynthétiques comprennent chlorophylles, caroténoïdes et xanthophylles. Ces pigments sont chacun sensibles à une gamme particulière de longueurs d'onde de lumière.

chloroplastes

Les cellules eucaryotes effectuer la photosynthèse dans une structure à double membranées spécialisé appelé le chloroplaste. Le chloroplaste contient une série empilée de membranes connues sous le nom des thylakoïdes. Pile de thylakoïdes sont appelés grana avec l'espace intermembranaire entre thylakoïdes appelé le stroma.

Lumière Réactions à charge

Lorsque la lumière frappe les pigments photosensibles tels que la chlorophylle, les électrons entrent dans un état de haute énergie. Par une série de moyens de transport d'électrons, l'énergie de ces électrons excités est utilisé pour créer de l'adénosine triphosphate (ATP) et de phosphate de dinucléotide d'adénine de la nicotine (NADPH). Ce processus est connu sous le nom photophosphorylation et se produit dans le grana.

Lumière Réactions indépendants

Les obligations de haute énergie produite lors des réactions dépendantes de lumière sont utilisés pour créer des liaisons carbone-carbone de dioxyde de carbone. Ce processus, parfois appelé le cycle de Calvin, comprend une série en plusieurs étapes de réactions enzymatiques afin de créer une molécule de sucre de glucose à partir de l'addition de carbone à partir d'une molécule de dioxyde de carbone à une molécule de départ appelé ribulose biphosphate.

Quelle est la température moyenne de Jupiter?

March 27

Quelle est la température moyenne de Jupiter?


Jupiter est une planète gazeuse avec un noyau chaud, et il y a un grand gradient de température entre la surface de la planète et son noyau. Sur la surface, cependant, la température reste constante, et il ne fait pas partie que les humains trouvent à l'aise si elles ont pu rester là.

Moyenne Surface Temperature

Jupiter possède un noyau solide de la taille de la Terre, mais la plupart de la planète est gazeuse, et à cause de cela, il n'a pas une surface bien définie. Les scientifiques définissent donc la surface de la couche atmosphérique, dans lequel la pression est la même que sur la surface de la Terre. A cette profondeur, la température est uniforme à moins 145 degrés Celsius (moins 234 degrés Fahrenheit), rapporte Space.com.

Surface à-Core Moyenne

Les scientifiques estiment que la température du noyau de Jupiter soit environ 24.000 degrés Celsius (43.000 degrés Fahrenheit), ce qui est plus chaud que la surface du soleil. Ceci met la température moyenne à l'intérieur de la planète dans le voisinage de 12 000 degrés Celsius (21,500 degrés Fahrenheit).

Quelle est l'importance de Enzymes?

February 25

Quelle est l'importance de Enzymes?


Les enzymes sont des molécules qui servent de catalyseurs pour des réactions. C'est, les réactions se produisent plus rapidement et efficacement lorsque les enzymes sont présents. Dans de nombreux cas, les enzymes favorisent des réactions qui peuvent ne pas être possible dans des circonstances normales.

Importance

Sans enzymes, la plupart des processus physiologiques ne se produiraient pas. Des centaines de différents types d'enzymes sont présentes dans les cellules végétales et animales et chacun est très spécifique dans sa fonction.

Fonction

Une enzyme fonctionne sur un substrat pour changer le substrat d'une manière quelconque. Dans des circonstances normales, l'énergie (connue sous le nom d'énergie d'activation) est nécessaire pour subir ce changement. Les enzymes réduisent l'énergie d'activation de telle sorte que la réaction nécessite moins d'énergie. Cela rend les réactions se produisent plus facilement et à un taux potentiellement plus rapide.

Histoire

En 1894, Emil Fischer a découvert que les enzymes sont très spécifiques pour le substrat sur lequel ils travaillent et les réactions qu'ils promeuvent. Il a nommé cette spécificité de la "clé" modèle. Depuis ce temps, les enzymes ont été trouvés pour être plus souple et capable de modifier légèrement la forme pour adapter les substrats.

Identification

La plupart des enzymes sont nommées avec le suffixe --ase sur la fin. La première partie du nom de l'enzyme désigne le substrat sur lequel l'enzyme fonctionne. Par exemple, les enzymes protéase aident le système digestif décomposent les protéines, alors que cellulase décompose la cellulose dans les parois des cellules végétales.

Considérations

L'activité enzymatique peut être affectée par des facteurs externes, tels que la présence d'un produit chimique et dans des conditions extrêmes de température, de pH, ou un rayonnement ultraviolet. Ces facteurs externes peuvent détruire la structure protéique de l'enzyme, rendant inutile. Ceci est l'une des raisons fortes fièvres peuvent être mortelles.

La Fermentation efficace à l'éthanol à partir de cellulose

March 8

La Fermentation efficace à l'éthanol à partir de cellulose


La cellulose est la macromolécule biologique la plus abondante sur la Terre, le composant majeur des parois du bois et des cellules végétales. Si elle pouvait être fiable et efficace transformé en combustible tel que l'éthanol, la cellulose offrirait la société humaine une source d'énergie durable. De nombreux scientifiques travaillent à faire de ce rêve une réalité. Mais d'abord, ils devront surmonter plusieurs défis difficiles.

Pré-traitement

Tout d'abord, la biomasse est traitée en coupant vers le haut. Si la charge est en bois, par exemple, il peut être coupé en dés en petits morceaux, ce qui le rend plus facile à transporter et augmente également la superficie des réactions chimiques. Ensuite, la biomasse est prétraitée soit par explosion à la vapeur ou à l'hydrolyse acide. Dans la technique d'explosion de vapeur, l'eau est injectée dans les fibres végétales et chauffé rapidement de sorte qu'il se transforme en vapeur, éclatement ouvrir les faisceaux de fibres. Alternativement, les acides forts peuvent briser les faisceaux de fibres par hydrolyse acide.

Enzymatic hydrolyse

Ensuite, les fibres prétraitées sont exposées à une solution d'enzymes qui décomposent la cellulose en sucres de glucose. Endocellulase, exocellulase et bêta-glucosidase sont trois types d'enzymes qui jouent chacun un rôle dans ce processus. Endocellulase perturbe la structure de la cellulose, tandis que exocellulase fait des coupes à la fin des chaînes de cellulose. Beta-glucosidase rompt les liens entre les molécules voisines de glucose. Malheureusement, ce procédé ne dégrade pas la lignine également trouvé dans les parois cellulaires végétales, qui est plus réfractaire au traitement.

Fermentation

Ensuite, la solution de glucose est alimenté à des microbes tels que les levures, ce qui le consommer et de produire de l'éthanol comme sous-produit de leur métabolisme. Cette partie du processus est pas différent du processus de fermentation qui transforme le raisin en vin. La levure ne peut pas croître si la concentration d'éthanol est trop élevée, cependant, de sorte que le produit de fermentation doit ensuite être éliminé par distillation pour augmenter la concentration d'éthanol. Distillation ne peut atteindre une teneur en éthanol d'environ 97 pour cent, de sorte que les tamis moléculaires ou d'autres techniques sont nécessaires pour éliminer la teneur en eau restante.

Défis

Le principal obstacle à la commercialisation de l'éthanol cellulosique est le coût. L'éthanol cellulosique doit rivaliser avec l'essence et le maïs éthanol, qui sont tous deux moins cher à fabriquer. Les scientifiques travaillent à améliorer le processus de plusieurs façons différentes. parois de cellules végétales contiennent de l'hémicellulose, un polymère qui incorpore des sucres à la fois cinq et six atomes de carbone, mais la levure ne peuvent fermenter les sucres à six carbones. Certains chercheurs modification génétique de levure pour surmonter ce problème. D'autres travaillent pour réduire la teneur en lignine des plantes telles que le panic raide et le miscanthus, ce qui rendrait plus facile de les traiter efficacement. Peut-être le défi le plus important, cependant, est le coût relativement élevé des enzymes.

Comment calculer nanokatals par gramme

March 24

Un nanokatal par gramme se réfère à l'activité catalytique d'une enzyme. Pour déterminer cette activité catalytique, le débit des paramètres de conversion et d'expérimentation doit être fixée. Un katal par gramme d'enzyme trypsine est la quantité de trypsine nécessaire pour catalyser les obligations lorsque certaines conditions sont remplies. Lorsque les conditions changent, le nombre de liaisons qui sont catalysées va changer. Il est plus facile de calculer l'unité d'enzyme, puis convertir en nanokatals par gramme.

Instructions

1 Calculer l'unité d'enzyme. Cette unité est obtenue en multipliant la vitesse de réaction par la concentration de l'enzyme. Le taux d'unités de réaction sont (pmol / ml) / min et la concentration d'enzyme est normalement mg ​​/ ml.

Enzyme unité (U) = vitesse de réaction concentration x enzymatique

2 Calculer la vitesse de réaction du dosage enzymatique effectuée. Des essais enzymatiques fonctionnent en présentant un changement de couleur lorsque le produit est formé par l'enzyme au cours du temps. L'absorbance est mesurée par un spectrophotomètre.

(Finition absorbance - absorbance de départ) / temps de réaction = taux d'enzyme du changement (pmol / ml) / min

3 Convertir les unités enzymatiques à nanokatals. Le taux de conversion est de 1 U = 16,67 nanokatal.

Unités Enzyme * (16,67 nanokatal / 1 unité d'enzyme) = nanokatals.

4 Déterminer les nanokatal par gramme en divisant les nanokatal calculées par le poids de l'enzyme utilisée.

Les Nettoyeurs Meilleur Cloth Diaper pour Old Détachage

April 18

Les Nettoyeurs Meilleur Cloth Diaper pour Old Détachage


Personne aime voir les taches sur les couches en tissu, d'autant plus que nous savons exactement où ces taches sont venus. Si vous trouvez que même après le lavage régulier, quelques taches difficiles à supprimer sont laissés, vous avez quelques options pour vous aider à éliminer les taches anciennes sur vos couches lavables.

enzyme Cleaners

Utilisé pour prétraiter les vêtements avant de les laver, les nettoyants enzymatiques contiennent des protéines complexes qui se fixent pour colorer les molécules et agir comme catalyseurs en les décomposant. Communément un mélange de cultures d'enzymes vivants et des extraits botaniques, ces produits sont particulièrement utiles pour les vieilles taches de couches, comme les enzymes mangent et digèrent les taches organiques et les odeurs. nettoyants enzymatiques sont des produits sûrs et naturels qui sont biodégradables et ne contiennent pas de produits chimiques ou de vapeurs difficiles. En conséquence, ils sont un excellent choix pour les couches souillées, car ils ne seront pas irriter les fesses de votre bébé. Il est important de garder à l'esprit, cependant, que les nettoyants enzymatiques ne stérilisent pas et vêtements traités avec eux nécessite un lavage supplémentaire pour tuer les germes.

Soleil

Utile pour le blanchiment de plus que vos cheveux, le soleil avec ses rayons puissants est une autre option pour éliminer les taches anciennes. Il suffit de placer vos couches mouillées au soleil et laissez-les sécher. Les rayons vont naturellement blanchir les taches et désinfectez vos vêtements. Pour un effet de blanchiment supplémentaire, presser un citron vert ou un citron directement sur la tache avant de placer la couche au soleil. L'acide citrique dans les citrons et limes est un ingrédient utilisé dans de nombreux produits de nettoyage industriels pour dissoudre les taches.

Nettoyeurs oxygénés

blanchissants oxygénés sont couramment utilisés comme une alternative sûre à l'eau de Javel. Ces produits offrent la possibilité d'éliminer même les taches les plus tenaces. Combinez votre eau de Javel oxygéné avec de l'eau et laisser les couches à tremper environ une heure pour l'enlèvement dure tache.

Le peroxyde d'hydrogène peut également être utilisé pour nettoyer les taches sur les couches. Faites un test de tache sur le tissu pour vous assurer que le peroxyde ne tourne pas la couche jaune. Appliquer le peroxyde directement sur la zone souillée sur la couche pour enlever les taches.

Le bicarbonate de soude, également connu sous le nom de bicarbonate de soude, est une tache non toxique alternative à l'élimination des produits chimiques agressifs. Non seulement il aide à éliminer les taches, mais il permettra également d'éliminer les odeurs. Mélangez une petite quantité de bicarbonate de soude avec de l'eau et appliquer la pâte sur la tache. Laisser reposer pendant 30 minutes et laver normalement.

Qu'est-ce que ne pas utiliser

Bien que l'eau de Javel a longtemps été connu pour sa capacité à garder des vêtements de couleur blanche et propre, il mange aussi loin les fibres du tissu. Utilisation de l'eau de Javel sur les couches en tissu provoque les couches pour briser et mêlée.

assouplissants sont utilisés pour fabriquer des vêtements doux et laisser une odeur agréable, mais ils laissent aussi un résidu sur le tissu qui repousse l'eau, ce qui rend les couches moins absorbantes.

savons purs sont naturels, mais laissent un résidu hydrofuge sur les couches.

Protocoles Assay GSH

May 30

Protocoles Assay GSH


Glutathion ou GSH est une protéine présente dans les plantes et les animaux. Il travaille pour aider les réactions enzymatiques dans la détoxication des contaminants environnementaux. De plus, il facilite le transport d'acides aminés au sein des cellules et contribue à maintenir les réactions de réduction des protéines sulfhydryle. protocoles GSH Assay utilisent GSH des tampons, des normes, substrat, des enzymes et des réactifs. En suivant la procédure spécifique est pertinente à l'issue de l'essai.

Méthode de recyclage Enzymatic

Procédé de recyclage enzymatique, pour le GSH, utilise glutathion réductase pour quantifier GSH. Ce protocole est spécifiquement pour le plasma, échantillons de tissus ou de cellules en culture. Ajouter le DTNB réactif (acide 5-5'-dithio-bis-2-nitrobenzoïque) à GSH. Le groupe sulfhydryle GSH réagit avec le réactif et produit un acide jaune appelé 5-thio-2-nitrobenzoïque (TNB). Ajouter glutathion réductase au mélange d'acide et GSH à recycler GSH et produire plus d'acide. Dans cette procédure, le taux de production d'acide est proportionnelle à la réaction de recyclage de GSH; par conséquent, mesurer l'absorbance de l'acide TNB en utilisant un spectrophotomètre. L'absorbance fournit une estimation de la quantité réelle de GSH dans l'échantillon.

Dosage des cellules hépatiques glutathione

Ce protocole analyse la quantité de GSH dans l'hépatocarcinome humain (cancer du foie) des cellules. Pour mener à bien cette procédure, utilisez la méthode colorimétrique pour la détermination GSH pour réduire et oxyder GSH. Réduire le GSH en utilisant 5-5'-dithiobis (acide 2-nitrobenzoïque ou DTNB) pour former le

Produit d'acide 2-nitro-5-thiobenzoïque de couleur et de glutathion oxydé (GSSG). Utilisez la glutathion réductase pour réduire GSSG pour former à nouveau GSH. Afin de mesurer la quantité de GSH dans les cellules du foie, lire l'échantillon à 415 absorbance cinétiquement sur un lecteur de microplaques.

cellule apoptose

Dans ce protocole, GSH est utilisée pour détecter l'apoptose cellulaire (mort) par la mesure de la diminution de GSH réduit. Une diminution de la concentration de GSH cellulaire est un indicateur de la mort cellulaire. Colorer les cellules échantillons avec vert Thiolite non fluorescent. accumule Le vert Thiolite dans le cytosol (cellule plasma) et des mitochondries (centrale électrique) de la cellule. En utilisant un cytomètre de flux à 490/520 nm pour visualiser la quantité de GSH dans les cellules.

Concentration totale de GSH dans animales et végétales échantillons

Mesurer la concentration du total GSH sous la forme à la fois réduite et oxydée dans différents échantillons d'animaux et de plantes. Ajouter le réactif de type thiol général, 5-5'-dithiobis [acide 2-nitrobenzoïque]. Le réactif thiol réagit avec GSH pour former 412 nm chromophore, l'acide 5-thionitrobenzoïque (TNB) et GS-TNB. Ajouter la glutathion réductase et du bêta-nicotinamide adénine dinucléotide phosphate (NADPH) pour réduire GS-TNB. Le glutathion publiera également une seconde molécule TMB et recycler le GSH. En outre, tout GSH oxydé (GSSG) présents dans le mélange fromed de la réaction de disulfure est également réduit en GSH. Utilisez un lecteur de microplaques à 405 nanomètres pour lire le niveau d'absorption et d'indiquer la concentration totale de GSH.