limportance de la culture cellulaire

Comment Purger milieu de culture cellulaire avec de l'azote

November 17

Comment Purger milieu de culture cellulaire avec de l'azote


Les études biologiques utilisent des cultures de cellules pour étudier les effets des médicaments, thérapies et pratiques sur les cycles et l'activité des cellules vie. La croissance des cellules et le maintien des lignées cellulaires se produisent dans un milieu de culture qui est bénéfique pour les cellules en question. Les médias fournit tous les nutriments et les conditions environnementales requises par les cellules. La plupart des cellules ont besoin d'une source d'azote pour rester en bonne santé et pour fournir certaines des exigences pour les nombreux procédés, les cellules subissent au cours de leur cycle de vie. Alors que l'azote peut être obtenu à partir d'ammoniac et d'autres substances contenant de l'azote, en purgeant le support fournit également une source de l'azote nécessaire.

Instructions

1 Versez votre milieu de culture cellulaire dans un grand bêcher et placer le bécher sur un agitateur mécanique. L'agitateur mélange le milieu pendant la purge par le courant d'azote. L'utilisation de cette méthode permet une préparation d'une grande quantité de milieu pour maintenir la composition plus uniforme.

2 Apposer un tube de barbotage à la sortie d'un réservoir d'azote. Un tube d'injection est constitué d'un tube en verre avec un embout en verre fritte incorporée dans l'extrémité du tube. L'extrémité ouverte du tube fixé à une longueur de tube en matière plastique relié à un réservoir d'azote fournit un courant d'azote lorsqu'elle sort de l'extrémité en verre fritte du tube par de nombreux courants de minuscules bulles de gaz.

3 Placer l'extrémité en verre fritte du tube d'injection dans le fond du récipient et tourner sur la console. Régler la vitesse de l'agitateur mécanique d'agitation pour fournir encore le mélange du milieu.

4 Allumez le flux d'azote au niveau du réservoir et lui permettre de bulle dans le milieu. L'azote sera saturer le milieu avec de l'azote comme il se dissout. Chaque liquide possède une solubilité limitée de gaz différents. Comme l'azote se dissout dans le milieu, d'autres gaz dissous sont expulsés du milieu. La purge élimine les gaz tels que l'oxygène et le dioxyde de carbone à partir du milieu de culture.

5 Permettre au courant d'azote à bulle d'au moins 15 minutes pour saturer le milieu, en fonction du débit du gaz de flux. Une fois la purge du milieu est terminée, retirez le tube en verre fritte du bêcher et transférer le milieu de culture cellulaire purgé à un récipient fermé et le ranger dans le réfrigérateur. La température réduite du réfrigérateur réduira le degré auquel les gaz se dissolvent dans le milieu au cours du stockage.

Cultures cellulaires et techniques stériles

June 26

Cultures cellulaires et techniques stériles


Sans travailler avec de bonnes techniques stériles, des expériences de culture cellulaire peut être un cauchemar. La contamination est commune. Il existe de nombreuses procédures et les étapes qui doivent être prises pour réduire ou éliminer le risque de contamination tout en travaillant avec les cultures nécessaires. Pratiquer de bonnes techniques stériles fait gagner du temps, de l'énergie et de l'argent.

Flammes

Cultures cellulaires et techniques stériles

becs Bunsen sont indispensables dans le travail de laboratoire stérile.

Toujours ouvertures de bouteille flamme lorsque vous versez tout ce qui sort d'une bouteille. Ceci est non seulement pour stériliser l'ouverture extérieure de la bouteille, mais de créer un courant d'air chaud provenant de l'ouverture de la bouteille. Ce courant d'air chaud monte et repousse la chute des particules de poussière ou des germes qui pourraient autrement contaminer le contenu de la bouteille.

boucles d'inoculation doivent toujours être flambé entre les utilisations. Lorsque vous travaillez avec des boîtes de Pétri et des boucles, un petit contenant de 100 pour cent d'éthanol à proximité. Aussi ont une lampe de flamme d'alcool ou le brûleur Bunsen à portée de main. Pour stériliser la boucle d'inoculation, le tremper dans l'éthanol et l'exécuter à travers la flamme. Tenez-le jusqu'à ce que le feu se éteint sur la boucle, puis touchez à la gélose de la boîte de Petri pour le refroidir. Il est prêt à l'emploi avec des cellules une fois que la boucle ne fait pas fondre la gélose au contact.

Travailler sous une hotte

Toujours travailler sous une armoire bio-sécurité lorsque vous travaillez avec des cultures de cellules. armoires Bio-sécurité diffèrent des hottes à flux laminaire, car l'air est filtré; dans les hottes à flux laminaire, l'air est simplement distribué. L'air filtré représente une forte diminution du risque de contamination pour les cultures cellulaires.

Incubateur Propreté

Toujours travailler avec un incubateur qui est exempt de cultures contaminées. Si vous trouvez une culture cellulaire a été inoculée avec soit un contaminant bactérien ou une levure, nettoyer l'incubateur immédiatement et ne pas mettre de nouvelles cultures de cellules en elle. Il ne sert à rien d'essayer puisque la levure peut être un contaminant dans l'air et la contamination bactérienne se propage facilement par contact.

Lorsque vous nettoyez un incubateur, autoclave toutes les pièces amovibles et essuyez l'intérieur avec une solution d'eau de Javel à 10 pour cent, suivi d'un rinçage. Ensuite, essuyez l'intérieur de l'incubateur avec une solution d'éthanol à 70 pour cent et le laisser sécher à l'air. Ne pas oublier d'éteindre l'injecteur de dioxyde de carbone et les alarmes associées lorsque vous nettoyez l'incubateur parce que la porte lui sera ouverte pendant une période de temps prolongée.

La filtration stérile

Certains médias peuvent être stérilisés par autoclavage sur un cycle liquide, comme milieu de gélose pour les colonies de boîte de Pétri. D'autres types de culture cellulaire, en particulier contenant des protéines, ne devraient pas être autoclavés parce que la chaleur et la pression dénaturent les protéines. Ces milieux doivent être stérilisés par filtration. Les contaminants qui peuvent détruire le milieu de culture cellulaire sont supérieures à 0,22 um, de manière à filtrer le milieu à travers une unité de filtration jetable avec un filtre de 0,22 um de taille de pores rend un milieu stérile.

autoclavage

Cultures cellulaires et techniques stériles

Les autoclaves sont généralement partagées entre les laboratoires.

Lorsque autoclavage outils et conteneurs, toujours utiliser du ruban autoclave. Couvrir toutes les ouvertures du récipient avec du papier et de mettre un morceau de ruban autoclave sur la feuille. Lorsque autoclavage liquides comme milieu de gélose ou de l'eau, utiliser un paramètre de liquide de sorte qu'il ne déborde pas que la pression est réduite. réglages liquides réduisent la pression à l'intérieur de l'autoclave plus lentement que les réglages secs pour correspondre à la lente diminution de la température. Ceci empêche le liquide de se répandre sur les côtés du récipient en raison de son point d'ébullition. Autoclaves devraient être fixés à 151 degrés C et ils doivent être exécutés pendant au moins 15 minutes à cette température.

Ethanol

Cultures cellulaires et techniques stériles

Bien que l'éthanol est le même alcool dans le vin, ne jamais boire de l'éthanol de qualité laboratoire.

Lorsque vous travaillez dans une zone stérile, toujours avoir une bouteille de 70 pour cent d'éthanol à portée de main pour désinfecter les surfaces de travail et de désinfecter les gants. Pour désinfecter un espace de travail, pulvériser la zone avec 70 pour cent d'éthanol et de l'essuyer avec un sans poussière lingette jetable. Pour stériliser les gants, vaporiser des gants que vous portez et frottez vos mains comme si vous les lavez. Laissez les gants sécher à l'air, mais ne soufflent pas sur eux. Haleine contient des contaminants. Pour accélérer le processus de séchage, vous pouvez tenir vos mains sur la prise d'air de l'armoire bio-sécurité vous travaillez sous.

Utilisez jetables

Chaque fois que vous pouvez, en utilisant du matériel jetable comme les boucles, les épandeurs, flacons et boîtes de Pétri rend la contamination d'une zone de travail stérile beaucoup moins probable, même si elle ne possède les inconvénients associés d'une plus grande dépense et plus la production de déchets.

Parlant

Cultures cellulaires et techniques stériles

Enregistrer parler avant ou après les procédures stériles, car le souffle contient des contaminants.

Bien qu'il soit souvent nécessaire d'expliquer une procédure ou d'enseigner à quelqu'un sur ce que vous faites lorsque vous travaillez sous une hotte, gardez la parole à un minimum. Si vous vous attendez à parler du tout, porter un masque facial. Essayez d'écrire ce que vous allez faire à l'avance afin que votre public peut suivre sans explications orales. Demander qu'ils économisent leurs questions pour après la procédure et suggèrent qu'ils écrivent des questions ou des commentaires qu'ils pensent pendant que vous travaillez.

L'importance de la stérilité en culture cellulaire

December 21

L'importance de la stérilité en culture cellulaire


Création d'un champ stérile est important en médecine et en sciences. Le champ stérile est une zone sans cellules vivantes indigènes. Cela comprend des bactéries aérobies et anaérobies, les virus, les levures et les moisissures. La stérilité est difficile à maintenir, mais il est essentiel lors de l'étude de la croissance et la mutation de n'importe quel type de cellule.

Histoire du champ stérile

Les cultures anciennes ont utilisé des techniques aseptiques pour traiter les aliments et les blessures. Alors qu'ils peuvent ne pas avoir su pourquoi, de nombreuses cultures lavées et plaies traitées avec une variété de traitements antiseptiques tels que le chlorure de mercure. Avant 1860, près de la moitié de tous les patients chirurgicaux est mort d'une infection. Louis Pasteur a montré comment les microorganismes affectés alimentaire et créé les champs stériles. Au début, les médecins rechigné à l'idée de se laver les mains entre les patients, mais la pratique est rapidement devenu la norme. L'introduction de microscopes de puissance plus élevés, des colorants cellulaires et les taches donne aux chercheurs une meilleure vision du monde cellulaire.

Pourquoi cellules Culture

Il y a plusieurs raisons à des cellules de culture. Certaines cellules de culture des chercheurs de croître un échantillon suffisamment grand pour étudier - par exemple, si un élève se penche sur la façon dont il existe de nombreux types de bactéries sur un peigne. L'étudiant pourrait facilement regarder le peigne, mais les colonies bactériennes sont trop petites pour voir clairement. Alors qu'un peigne est un problème mineur, un médecin ou un diagnosticien utilise le même processus pour développer des échantillons de bactéries non identifiées dans le sang, l'urine ou la peau d'un patient souffrant d'une maladie mystérieuse. Les chercheurs ont également des cellules de culture pour voir quel effet, le cas échéant, la lumière, les produits chimiques ou d'autres micro-organismes ont sur les cellules.

L'importance du champ stérile

Alors que le chercheur travaille pour déterminer les bactéries dans un échantillon, il est essentiel que le chercheur est sûr qu'il regarde seulement les bactéries de l'échantillon. Par exemple, un médecin peut envoyer un échantillon de selles au laboratoire pour rechercher une infection fongique. Certains champignons indiquent une infection ou une inflammation. Le chercheur met l'échantillon dans les milieux stériles et montres pour des signes de toute croissance. Si le support est stérile, toute croissance fongique provient de l'appareil digestif du patient. Toutefois, si les médias est contaminé par un autre échantillon, la manipulation précaire ou même les bactéries de l'air, l'ensemble du test est entachée. Elle peut conduire le médecin à un mauvais diagnostic et même un traitement inapproprié.

Comment garder Média Stérile

Aujourd'hui, la plupart des médias stérile est fabriquée et scellée dans un environnement stérile. Cependant, les accidents se produisent. Avant d'utiliser des milieux stériles, le chercheur doit étroitement inspecter l'article. Chaque pièce a une date d'expiration. Éliminer tous les médias expiré. Vérifiez le conteneur pour des fissures ou des joints brisés. Se laver les mains avant de manipuler les médias ou l'échantillon. Laver l'extérieur des deux médias et des conteneurs d'échantillons. Et utiliser uniquement les articles stériles pour déplacer l'échantillon dans les médias.

Comment préparer les lysats cellulaires

May 10

Comment préparer les lysats cellulaires


L'étape clé dans le fonctionnement d'une expérience d'analyse de protéine réussie prépare un lysat cellulaire de haute qualité. Western blots sont quelques-unes des expériences les plus communes de protéines d'analyse effectuées dans les laboratoires de recherche biologique, et la préparation de lysat cellulaire est la première étape. L'analyse des protéines et la protéomique permettent aux scientifiques de se renseigner sur les fonctions des protéines à travers les systèmes biologiques.

Instructions

1 Porter des gants avant de manipuler un des matériaux ou de l'équipement.

2 Préparer le tampon de lyse en combinant les ingrédients énumérés dans "Choses que vous devez." Ajuster le pH du tampon à 6,8 au moyen d'acide chlorhydrique.

3 Refroidir le tampon de lyse. Si le tampon de lyse est préparé un jour ou plus à l'avance, se détendre dans le réfrigérateur. Sinon, le refroidir pendant 1 heure sur la glace.

4 Ajouter 1,5 ml de la culture de cellules en suspension dans un tube à centrifuger de 1,5 ml.

5 Spin le tube à 3200 rotations par minute (RPM) pendant 2 minutes dans la centrifugeuse. Filage provoque les cellules pour former un culot au fond du tube. Le milieu de culture cellulaire doit être translucide à la fin du cycle de la centrifugeuse.

6 Jeter le surnageant, en prenant soin de ne pas perturber le culot au fond du tube.

7 Remettre en suspension le culot dans 150 ul de tampon de lyse refroidi. Ce qui contribue à solubiliser le culot de cellules et commence le processus de rupture des membranes cellulaires.

8 Ajouter des perles de verre pour augmenter le volume total dans le tube de 0,3 ml. Les billes provoquent l'agrégation supplémentaire du culot cellulaire lorsque tourbillonnement.

9 Vortex du tube sur le vortex à pleine vitesse pendant 1 minute.

dix Refroidir le tube pendant 30 secondes sur la glace. Évitez d'exposer le tube pour réchauffer des températures pendant de longues durées, car cela peut conduire à la dégradation des protéines.

11 Vortex le tube à nouveau à pleine vitesse pendant 1 minute.

12 Centrifuger le tube à 2400 RPM pour retirer les constituants du lysat de cellules en un culot au fond du tube.

13 Les lysats cellulaires de magasin dans le congélateur.

Types de lignées cellulaires

July 9

Types de lignées cellulaires


Dans le domaine de la biotechnologie, les lignées cellulaires sont produites dans une culture de croissance ou moyenne. Ces supports permettent aux chercheurs de comprendre les processus chimiques qui permettent aux cellules de fabriquer leurs propres structures. Les types de lignées cellulaires utilisées pour le clonage ou la combinaison de matériaux cellulaires comprennent des lignées finies et continues. Le type de ligne utilisée dépend de l'objectif global du projet.

Lignées cellulaires Finite

Comme la plupart des organismes vivants, les cellules ont une durée de vie préprogrammé qui détermine le nombre de fois qu'une cellule est capable de se diviser. Ceci est un phénomène naturel appelé sénescence cellulaire, ce qui rend la plupart des lignées cellulaires finies. lignées cellulaires Finite se développent dans des cultures de cellules primaires où la première tentative de lignées cellulaires de culture est faite, selon la biotechnologie 4U, un site de référence de la biologie. des cultures de cellules primaires peuvent consister en des types de cellules dépendantes et / ou indépendantes. les cellules dépendantes nécessitent le milieu de culture réelle afin de se développer. Le milieu de culture fournit certains matériaux et les nutriments nécessaires pour maintenir la vie des cellules dépendantes. cellules indépendantes peuvent se développer dans un environnement suspendu, ce qui signifie qu'ils ne nécessitent pas le milieu de culture pour la survie ou pour les processus de croissance de se produire.

Lignées cellulaires continues

La biotechnologie selon la 4U, les lignées cellulaires continues sont obtenues à partir des cellules survivantes d'une culture de cellules primaires. Dans les cas où des cellules dans une culture primaire sont clonés ou transformées, des lignées cellulaires continues peut être utilisée pour développer une culture de cellules secondaires. Les lignées cellulaires continues dérivées de cellules dépendantes auront besoin d'un milieu de culture frais qui prend en charge les fonctions vitales des cellules. cultures secondaires dérivées de lignées cellulaires indépendantes conservent leur capacité à se développer sous forme de suspension, mais un deuxième récipient de culture est nécessaire pour le transfert des cellules survivantes. lignées cellulaires Finite qui se débarrassent de leur culture primaire sont généralement repiquées ou clivés à partir du milieu primaire et transférés dans une culture secondaire. Dans un sens, ce sont aussi des lignées cellulaires continues qui ont dépassé leur milieu de culture d'origine.

Considérations

lignées cellulaires finie et continue ont des caractéristiques différentes qui influent sur le résultat global d'un projet de culture cellulaire. Le but d'un projet particulier aidera à déterminer quel type de lignée cellulaire peuvent apporter les meilleurs résultats, selon Invitrogen, un site de ressources de la biotechnologie. Depuis plusieurs environnements de culture sont le résultat prévu dans un projet de clonage, les caractéristiques d'auto-suffisante trouvés dans des lignées cellulaires continues réduit considérablement la quantité d'entretien requis par rapport aux lignées cellulaires finies. Projets axés sur les activités de renforcement compréhension des cellules peuvent bénéficier de l'utilisation de lignées cellulaires finies, puisque le but du projet est centré sur la progression naturelle des interactions chimiques au sein de la cellule.

Comment synchroniser les cycles cellulaires

November 14

Comment synchroniser les cycles cellulaires


En biologie cellulaire, il est souvent nécessaire de coordonner ou "synchroniser" les cellules dans une culture de sorte que la majorité des cellules sont au même stade de développement ou mitose en même temps. Cette synchronisation permet aux scientifiques d'étudier la façon dont le développement des cellules est affectée par divers changements dans les conditions de croissance des cellules telles que la température et les différences de lumière, ou l'introduction de produits chimiques ou d'agents viraux. La synchronisation requiert le développement des cellules arrêt une fois la cellule atteint un certain stade. De nombreuses méthodes existent pour arrêter le développement; dont l'un est l'introduction d'une substance telle que nocodazole à la culture cellulaire.

Instructions

1 Séparer le moyen de votre culture cellulaire. Rincer la culture cellulaire avec dix millilitres de la solution tampon phosphate.

2 Placez la culture rincés dans une boîte de Pétri avec le milieu complet avec nocodazole. Incuber le plat avec le milieu de culture et à 37 degrés Celsius pendant 12 heures.

3 Retirer le plat de l'incubateur. Rincez avec le milieu de culture, puis appuyez sur le plat légèrement. Les cellules mitotiques rondes vont secouer lâche et peut être mis au rebut.

4 Transférer le milieu complet à partir de la boîte de Petri dans les tubes en polypropylène. Cap les tubes puis centrifuger eux à 1000 xg (environ 1600 rpm) pendant 10 minutes.

5 Utilisez la pipette pour éliminer le surnageant (liquide dans les tubes centrifugés). Ajouter 15 ml de solution de tampon phosphate dans chaque tube pour remettre en suspension le solide restant (le culot de cellules). Centrifuger les tubes à 1000 g pendant 10 minutes.

6 Utiliser la pipette pour éliminer le surnageant dans chaque tube. Ajouter un milieu complet (sans nocodazole). Les cellules sont maintenant prêts à utiliser pour votre expérience.

Conseils et avertissements

  • Chaque laboratoire a une recette différente pour un milieu complet et milieu de culture. Suivez les protocoles de votre laboratoire.

Types de culture tissulaire Contamination

January 25

Types de culture tissulaire Contamination


La culture de tissus, ou de culture cellulaire (les termes sont utilisés de façon interchangeable) est le processus par lequel les cellules sont cultivées et maintenues dans un environnement contrôlé, comme un laboratoire, en dehors de leur source naturelle et originale. La culture cellulaire est une technique essentielle dans de nombreuses branches de la recherche biologique, de la recherche sur le cancer pour le développement de vaccins.

Les scientifiques doivent maintenir une technique aseptique prudent et respecter les procédures propres et stériles appropriées lors de la manipulation des cellules afin de les maintenir en vie et en bonne santé. Il existe plusieurs types de contaminants, mais tous résultat dans la mort cellulaire et des cultures inutiles qui coûtent le laboratoire à la fois du temps et de l'argent.

contamination chimique

La contamination chimique est la présence d'une substance non-vivant dans la culture cellulaire qui provoque des effets nocifs sur les cellules. Cela peut inclure les médias impurs, le sérum ou même de l'eau qui peuvent contenir des endotoxines indésirables ou de composés organiques si non purifié. En outre, des niveaux toxiques de même nutriments essentiels peuvent être nocifs, et l'exposition à trop de lumière fluorescente peuvent altérer négativement la composition chimique des médias. Les contaminants chimiques peuvent aussi provenir de réservoirs de stockage impurs.

Cross Culture Contamination

la contamination de la culture croisée se produit quand un type de cellule différent est introduit par inadvertance dans les cellules qui sont cultivées. Ceci est un problème important, car ce nouveau type de cellule peut avoir une morphologie et une fonction différente et réagissent différemment à des conditions expérimentales appliquées. la contamination de la culture Croix annule l'expérience parce que les résultats ne peuvent pas être valide ou crédible, parce que l'effet des cellules contaminantes est inconnue.

Les bactéries, champignons ou levures

Ces micro-organismes sont contaminateurs de culture de cellules les plus courantes car elles fleurissent dans tous les milieux et sont facilement transférables d'une source extérieure (tels que les instruments de laboratoire, des gants ou des vêtements) aux cellules. Ils grandissent vite et peuvent être facilement visibles au microscope. Les indicateurs visuels de contamination comprennent les médias changement de couleur en raison d'un changement de pH, la turbidité, la présence d'un matériau non-cellulaire, vacuolisation cellulaire, ou même la lyse des cellules et la mort.

Mycoplasma

Mycoplasmes sont des bactéries ressemblant à de très petits organismes qui sont gênants contaminateurs de cultures cellulaires. Mycoplasmes ont la capacité de modifier la morphologie, de la fonction, le métabolisme, la croissance et l'attachement de la cellule hôte de la culture dans le récipient de culture. Par conséquent, la crédibilité de toutes les expériences réalisées avec des cellules de mycoplasmes contaminées est discutable car les cellules hôtes n'agissent normalement. Mycoplasma est également une grande préoccupation, car il peut être difficile à détecter, ce qui provoque aucun signe de contamination visuelle comme des changements de pH, la turbidité ou des effets cytopathiques.

Virus

contaminateurs virales sont pratiquement invisible et indétectable et difficile à enlever d'une culture, parce qu'ils sont si petits. Ils ont besoin de la machinerie d'une cellule hôte pour se répliquer et peuvent ou peuvent ne pas causer des dommages à la culture de la cellule hôte qu'ils envahissent. Sinon, ils passent inaperçues, mais si elles sont cytopathique (toxiques), la culture cellulaire seront détruits, apparemment sans raison.

Les avantages de l'hybridation fluorescente in situ

November 19

Fluorescent In Situ Hybridation, ou FISH, est un processus scientifique utilisé pour analyser les chromosomes. FISH est couramment utilisé pour détecter le syndrome de Down dans un fœtus en vérifiant des anomalies chromosomiques. En raison de la nature de haute technologie du processus, FISH a quatre principaux avantages.

Aucune culture

Un des plus grands avantages de FISH est que les cellules ne doivent pas être cultivées pour effectuer l'analyse, contrairement à d'autres types de tests qui nécessitent des cellules cultivées. Par conséquent, en utilisant FISH est un moyen relativement efficace et sans tracas pour effectuer des tests sur les chromosomes.

Résultats rapides

Un autre avantage est la quantité de temps relativement court qu'il faut pour obtenir des résultats. Comme le poisson ne nécessite pas de cellules à cultiver, le temps nécessaire à l'analyse des chromosomes est réduit de façon substantielle. Ceci est supérieur à caryotype traditionnels, comme la culture cellulaire pour caryotype peut prendre jusqu'à deux semaines. les résultats de FISH peuvent généralement être obtenues dans les trois ou quatre jours après avoir été envoyé à un laboratoire. Bien que cela ne fournit pas autant d'informations détaillées sur les chromosomes comme un caryotype, il dit encore combien de chromosomes sont présents.

Versatilité

Le procédé de l'hybridation fluorescente in situ est également bénéfique en raison de la souplesse qu'elle offre. L'étude de chromosomes par d'autres moyens nécessite habituellement les cellules à se diviser, alors FISH ne fait pas. En outre, FISH ne nécessite pas de cellules d'être en vie, que la plupart des autres méthodes nécessitent.

Très sensible

La capacité d'hybridation fluorescente in situ pour détecter des séquences spécifiques d'acide nucléique est également avantageuse. À son tour, ce processus est souvent préféré à des méthodes plus anciennes, plus traditionnelles qui sont moins sensibles.

Qu'est-ce que Protein Electrophoresis?

January 27

L'un des aspects de protéines qui les rend utiles pour l'analyse est leur variabilité. Différentes protéines auront différentes tailles, formes et charges électriques. Les médecins et les chercheurs peuvent tirer profit de ces propriétés via un processus appelé électrophorèse, qui utilise l'électricité pour séparer les protéines en fonction de leurs propriétés. L'électrophorèse des protéines permet la séparation et l'identification des mélanges de protéines et est une technique essentielle de la recherche médicale et scientifique.

Identification

L'électrophorèse des protéines est l'utilisation d'un courant électrique, associé à un dispositif de séparation, pour étaler les protéines. Dans le passé, les protéines ont été séparées à l'aide du papier d'électrophorèse, mais dans les temps modernes gels spéciaux sont utilisés pour séparer les protéines. Ces protéines peuvent alors être identifiées en poids ou par l'utilisation d'anticorps spécifiques destinés à l'identification des protéines.

méthode

L'électrophorèse sur gel utilise un courant électrique pour le transport de protéines à travers un gel spécialement conçu qui va alors servir à empêcher ces protéines. Le type le plus commun de gel est l'une avec des particules qui ralentiront les protéines en fonction de leur taille. Les protéines sont poussés vers l'avant par l'utilisation d'un courant électrique. protéines plus petites sont moins encombrées par le gel, les obligeant à se déplacer plus rapidement. L'électrophorèse sur gel nécessite généralement l'utilisation simultanée d'un étalon de protéine, qui est un mélange de protéines de taille connue qui peut aider à déterminer la taille des protéines étant mesurée expérimentalement.

Analyse de sang

L'électrophorèse sur gel est couramment utilisé en médecine pour analyser les protéines dans le sang. Cette technique peut être utilisée pour distinguer entre l'albumine, qui est utilisé par le corps pour réguler le débit d'eau dans et hors du sang, et les immunoglobulines, qui sont des protéines impliquées dans le système immunitaire. L'albumine sérique est généralement très faible et se déplace plus rapidement que les autres protéines du sang. Les faibles niveaux d'albumine de sérum sont indicatives d'une maladie du foie, le foie est impliqué dans la prise de la protéine.

Maladies Immunoglobulines

Certaines maladies peuvent être distinguées par leurs effets sur les protéines d'immunoglobulines. Certains cancers des cellules du sang peuvent causer des niveaux élevés de protéines sanguines spécifiques appelées gamma-globulines, ce qui conduit à une condition connue sous le nom hypergammaglobulinémie. Cette condition peut être identifié par électrophorèse des protéines. D'autres conditions qui peuvent conduire à des altérations dans les résultats de l'électrophorèse des protéines comprennent le lupus, l'hépatite et l'infection et l'électrophorèse des protéines peuvent être utilisées pour identifier ces maladies.

Utilisations de recherche

L'électrophorèse des protéines est aussi couramment utilisé comme une partie de la recherche scientifique. Dans de nombreux cas, les scientifiques devront prendre un mélange de protéines et de les séparer en vue de déterminer les niveaux de protéines spécifiques qu'ils étudient. Une des façons les plus faciles à faire est de séparer ces protéines en utilisant une électrophorèse sur gel et ensuite pour identifier la protéine d'intérêt à l'aide d'un anticorps, qui est une petite protéine qui est conçu pour reconnaître et se lier à la protéine d'intérêt. Cela permet aux chercheurs de déterminer la présence et la quantité relative de la protéine qu'ils étudient dans un tissu ou dans des cultures cellulaires.

Choses que vous pourriez Voir avec un microscope composé

June 16

Un microscope composé est un type de microscope optique, qui utilise des lentilles différentes afin d'obtenir différents niveaux d'agrandissement. La possibilité de changer grossissements fait un microscope composé utile pour étudier une variété de spécimens et en examinant le même échantillon sous divers niveaux de détail. chercheurs médicaux, des biologistes et botanistes utilisent microscopes optiques composés dans leurs domaines, et les enseignants les utilisent pour donner à leurs élèves une meilleure compréhension de la structure des échantillons biologiques.

Les bactéries

Vous pouvez visualiser les bactéries avec un grossissement entre 400x et 1000x, mais il y a plusieurs inconvénients à l'aide d'une lumière composé microscope pour observer les bactéries. Les bactéries vont flotter dans et hors du foyer à fort grossissement, ce qui rend difficile de se concentrer sur votre spécimen. Les bactéries ne montre que la couleur quand ils font partie d'une colonie, ce qui rend difficile à repérer des cellules individuelles. Biologistes contrer le problème de la transparence grâce à la coloration, ce qui ajoute de la couleur aux bactéries autrement transparentes.

Levure

Il y a beaucoup de différents types de levure que vous pouvez observer à l'aide d'un microscope composé. Vous pouvez observer le processus croissant de pain. Sous de forts grossissements, vous pouvez voir les bulles de gaz se forment dans la levure qui provoque le pain à la hausse. Haute grossissements vous permet également de visualiser les cellules de levure et d'observer le processus que la levure utilise pour multiple (connu sous le nom "bourgeonnement").

Les cellules humaines

microscopes composés sont assez forts pour observer les cellules humaines, mais pas assez fort pour faire sortir beaucoup de détails dans les parties de cellules individuelles. Le niveau de grossissement fourni par microscopes composés est suffisamment forte pour afficher la structure générale de la cellule, ce qui les rend utiles pour identifier les irrégularités sous la forme d'une cellule.

Autres utilisations

microscopes optiques sont également utilisés pour déterminer la densité d'une culture cellulaire ou le nombre de cellules par unité de volume. Lorsqu'ils sont utilisés à cette fin, les échantillons sont généralement placés dans une chambre de comptage: un type plus épais de la diapositive qui est divisée en carrés d'une zone déterminée. En regardant les cellules dans une chambre de comptage permet de compter le nombre de cellules situées dans un carré particulier. La superficie de la place est spécifique au type de chambre de comptage, il vous permet de déterminer le nombre de cellules par unité dans ce domaine.