Pourquoi est le sodium utilisés dans l'extraction de l'ADN?

February 28

Pourquoi est le sodium utilisés dans l'extraction de l'ADN?


ADN - acide désoxyribonucléique - est une molécule dans le noyau d'une cellule qui contient l'information génétique. Extraire l'ADN implique une série d'étapes pour briser doucement pour ouvrir la cellule, brisez la membrane nucléaire, séparer l'ADN des protéines, puis l'amener à précipiter d'une solution. Ceci est réalisé à l'aide de divers produits chimiques, basé sur la structure des membranes, de l'ADN et de son électronégativité. Le chlorure de sodium ou d'autres composés contenant du sodium, sont utilisés pour stabiliser l'ADN après qu'il ait été débarrassé de ses protéines et faciliter la précipitation.

La structure de l'ADN

La structure de base de l'ADN est deux longs brins de nucléotides enfilées avec squelettes sucre-phosphate qui les entourent. L'ADN est en outre conçu par torsion et enroulant sur lui-même, avec diverses protéines associées à garder les brins organisés et démêlé. Dans son état natif, la partie de l'ADN plus étroitement exposée à l'environnement est l'épine dorsale du sucre-phosphate. À l'intérieur de la cellule, ce milieu est essentiellement de l'eau; dans lequel l'ADN est soluble. Il est soluble dans l'eau en raison de sa polarité globale.

ADN Polarité

"Polarity" est un terme de chimie décrivant des molécules qui contiennent une répartition inégale des charges électriques. Selon Paul Zumbo de Cornell Medical College, tous les acides nucléiques sont polaires. Dans le cas de l'ADN, les groupes phosphates hautement polaires sur le squelette portent des charges négatives. Cette propriété représente la solubilité dans l'eau, car l'eau est aussi polaire. Les charges positives d'eau interagissent avec les charges négatives de l'ADN et de faire une solution. Pour récupérer l'ADN pour un test supplémentaire ou la visualisation, l'ADN doit être précipité à partir d'une solution avec de l'eau. Puisque l'eau a une charge positive relativement faible, cela est accompli en fournissant un ion fort chargé positivement dans la solution. Le sodium est le candidat idéal pour cela.

La précipitation de l'ADN en utilisant le sodium et l'alcool

Une fois que l'ADN a été retiré du noyau d'une cellule et on a laissé se mélanger avec l'eau, l'introduction d'ions sodium crée une attraction temporaire entre le sodium et le squelette. L'ADN est temporairement neutralisé et ensuite facilement désolidarisé de l'eau. A ce stade, l'introduction d'un alcool oblige les ions d'ADN et de sodium pour devenir encore plus étroitement liés, puisque l'alcool est très apolaire. L'éthanol ou l'alcool isopropylique peuvent être utilisés. Une fois que l'ADN est dissocié de l'eau et étroitement lié au sodium, il va précipiter hors de la solution dans laquelle il peut être concentré pour la purification ou visualisée par bobiner doucement autour d'une tige de verre lisse.

Autres étapes dans Extraction ADN

Briser la membrane plasmique et une membrane nucléaire à l'ADN provenant de cellules d'accès est habituellement effectuée en introduisant d'abord un détergent d'une certaine sorte de briser les molécules lipidiques. Un détergent couramment utilisé dans les laboratoires est le SDS, ou du dodécylsulfate de sodium; mais pour les extractions simples, même savon peut être utilisé. Si les cellules sont dérivées de matières végétales, les enzymes sont habituellement ajoutés pour digérer la paroi cellulaire.