Le complexe majeur d'histocompatibilité ou CMH, comprend un groupe de gènes qui codent pour des protéines qui présentent des fragments de protéines à la surface cellulaire pour la reconnaissance par les globules blancs. Chez les humains, le CMH est appelé HLA, ou un antigène de leucocyte humain. Le système immunitaire utilise les protéines HLA de distinguer le «soi» de «non-soi» - ses propres cellules des envahisseurs. Lors de l'exécution des procédures telles que les greffes de moelle osseuse, les différences dans les AcVC entre deux individus peuvent causer des problèmes tels que la maladie du greffon contre l'hôte, où les cellules de l'attaque des donneurs de cellules T propres de la patiente. Typing gènes HLA spécifiques du donneur et en les comparant avec des gènes HLA spécifiques chez le receveur peut aider à assurer un bon match.
Sérotypage
méthodes sérotypage utilisent des anticorps pour distinguer entre les différents variants d'une protéine HLA donnée. Chaque anticorps est hautement spécifique pour une molécule donnée. En utilisant des anticorps différents, les scientifiques peuvent diviser AcVC en différents «sérotypes» et déterminer si des patients et des donneurs sérotypes pour certains AcVC sont un bon match. Cette méthode a été largement supplanté par de nouvelles méthodes basées sur l'ADN, qui sont plus précises et souvent plus facile à réaliser.
PCR
Une stratégie pour le typage HLA repose sur une technique classique de biologie moléculaire appelée PCR ou une réaction en chaîne par polymérase. Fondamentalement, la PCR fait de nombreuses copies d'un segment d'ADN; la région qui est copiée ou "amplifié" est spécifié par deux pièces courtes d'ADN appelés amorces. Pour ce faire le typage HLA, techniciens de laboratoire peuvent utiliser des amorces qui ne fonctionne que pour certaines versions d'un gène HLA donné mais pas d'autres. En exécutant la réaction PCR avec certaines amorces, les techniciens peuvent déterminer quelles variantes sont présentes dans le patient et le donneur potentiel.
Southern Blot
Une autre méthode basée sur l'ADN est très similaire à une technique de biologie moléculaire appelé transfert de Southern. Tout d'abord, la PCR est utilisée pour amplifier les gènes HLA spécifiques. Ensuite, les produits de la réaction de PCR sont séparés par taille et transférés sur une membrane. La membrane est traitée avec un petit morceau d'ADN appelée sonde; cette sonde a été marquée par un isotope radioactif ou "radiomarqué." La sonde ne se lie à l'ADN sur la membrane si une correspondance séquence (c.-à-complémentaire) est présent. En testant la membrane avec différentes sondes d'ADN, le technicien peut déterminer les variantes d'un gène HLA donnée sont présents.
Gene Sequencing
La méthode la plus précise et exacte pour le typage HLA est séquencer directement les gènes HLA de donneur et patient et la comparaison des séquences. Historiquement, cela aurait été impossible compte tenu du coût élevé et des défis techniques impliqués; au cours des dernières années, cependant, le coût a chuté de façon spectaculaire, et pour certains le séquençage des gènes des laboratoires peut maintenant être une option viable. Son principal avantage réside dans sa capacité à distinguer les différentes variantes d'un gène HLA donné.