Les études biologiques utilisent des cultures de cellules pour étudier les effets des médicaments, thérapies et pratiques sur les cycles et l'activité des cellules vie. La croissance des cellules et le maintien des lignées cellulaires se produisent dans un milieu de culture qui est bénéfique pour les cellules en question. Les médias fournit tous les nutriments et les conditions environnementales requises par les cellules. La plupart des cellules ont besoin d'une source d'azote pour rester en bonne santé et pour fournir certaines des exigences pour les nombreux procédés, les cellules subissent au cours de leur cycle de vie. Alors que l'azote peut être obtenu à partir d'ammoniac et d'autres substances contenant de l'azote, en purgeant le support fournit également une source de l'azote nécessaire.
Instructions
1 Versez votre milieu de culture cellulaire dans un grand bêcher et placer le bécher sur un agitateur mécanique. L'agitateur mélange le milieu pendant la purge par le courant d'azote. L'utilisation de cette méthode permet une préparation d'une grande quantité de milieu pour maintenir la composition plus uniforme.
2 Apposer un tube de barbotage à la sortie d'un réservoir d'azote. Un tube d'injection est constitué d'un tube en verre avec un embout en verre fritte incorporée dans l'extrémité du tube. L'extrémité ouverte du tube fixé à une longueur de tube en matière plastique relié à un réservoir d'azote fournit un courant d'azote lorsqu'elle sort de l'extrémité en verre fritte du tube par de nombreux courants de minuscules bulles de gaz.
3 Placer l'extrémité en verre fritte du tube d'injection dans le fond du récipient et tourner sur la console. Régler la vitesse de l'agitateur mécanique d'agitation pour fournir encore le mélange du milieu.
4 Allumez le flux d'azote au niveau du réservoir et lui permettre de bulle dans le milieu. L'azote sera saturer le milieu avec de l'azote comme il se dissout. Chaque liquide possède une solubilité limitée de gaz différents. Comme l'azote se dissout dans le milieu, d'autres gaz dissous sont expulsés du milieu. La purge élimine les gaz tels que l'oxygène et le dioxyde de carbone à partir du milieu de culture.
5 Permettre au courant d'azote à bulle d'au moins 15 minutes pour saturer le milieu, en fonction du débit du gaz de flux. Une fois la purge du milieu est terminée, retirez le tube en verre fritte du bêcher et transférer le milieu de culture cellulaire purgé à un récipient fermé et le ranger dans le réfrigérateur. La température réduite du réfrigérateur réduira le degré auquel les gaz se dissolvent dans le milieu au cours du stockage.