Les anticorps sont utilisés comme réactifs dans des études immunologiques et des protéines qui ciblent l'étiquette. Par le marquage d'un anticorps avec une molécule fluorescente et permettant à cet anticorps de se lier à des antigènes d'intérêt, les molécules peuvent être localisées à travers un microscope à fluorescence. Parfois, les anticorps se lient à des antigènes ou des protéines non spécifiquement en raison des sites antigéniques hautement réactifs. La réduction de la liaison d'anticorps non spécifique est essentielle pour assurer la validité des résultats de la coloration de l'immunologie. Au cours d'une procédure d'immunologie de coloration normale indirecte, il est sage d'insérer un pas entre les deux applications d'anticorps pour réduire la liaison non spécifique.
Instructions
1 Mélanger le sérum de chèvre avec un tampon de lavage normal à une concentration de sérum de 2 pour cent. Ce mélange fonctionne comme un agent de blocage par liaison à tous les anticorps non spécifiques, réactifs, endogènes.
2 Appliquer l'agent de blocage du sérum de chèvre après étirage de l'anticorps primaire provenant de l'échantillon.
3 Laissez l'agent de blocage sur l'échantillon pendant 1 heure à température ambiante sur un agitateur.
4 Prélever l'agent de blocage.
5 Rincer l'échantillon pendant 15 minutes trois fois en utilisant un tampon de rinçage normal.
6 Appliquer l'anticorps secondaire.
7 Terminez la procédure de coloration immunologique selon le protocole.