Les champignons doivent être isolés de l'influence de la flore contaminante mixtes sauvages de l'habitat fongique. Une fois séparés des autres formes de vie qui surcroissance, affaiblissent ou tuent les champignons, il est prêt à être cultivé comme souches pures dans un evironment de laboratoire contrôlé. Certains de la flore concurrentes poussent plus vite que les champignons et dévorent son approvisionnement alimentaire. La flore mixtes, appelées microbiote indigène par des scientifiques, notamment des protistes, des bactéries, d'autres espèces non désirables de champignons et levures.
Instructions
1 Mettre en place et équiper une salle propre à cultiver les champignons que vous voulez isoler et purifier des contaminants de la flore mixte de son environnement extérieur. Choisissez une chambre fraîchement peinte avec peu de circulation de l'air. Porter des vêtements propres et une douche avant de travailler avec des cultures de champignons. Installez un purificateur d'air. Empêcher la contamination par le port de gants en latex et un masque. Vaporisez vos gants fréquemment avec de l'alcool isopropylique. Maintenir le niveau des organismes de la flore mixtes faible dans la chambre.
2 Préparer le milieu d'agar pour faire pousser les champignons pendant le processus d'isolement et de purification. Suivez les instructions sur le récipient pour dissoudre la gélose sèche dans l'eau dans un récipient autoclavable. Empiler des boîtes de Pétri, scalpels et l'agar-agar dans une cocotte-minute. Sterilze par la cuisson pendant 25 minutes à 15 psi. Refroidir la casserole et placez les plats et les outils dans une boîte d'inoculation avec un couvercle en verre et des trous à l'avant pour vos mains. Verser la gélose dans les plats pendant qu'il est chaud. Remplissez-les à mi-chemin.
3 Recherchez une population de champignons que vous souhaitez isoler. Sélectionnez un corps de fructification propre, connu comme un carpophore. Mettez des gants stériles, recueillir le carpophore et le mettre dans un sac en plastique propre. Prenez-le au laboratoire et le mettre sur une surface stérile. Désinfecter la peau carpophores avec une solution d'iode et d'alcool. Découpez minuscules sections de l'intérieur après enlevant la peau. Placer les pièces dans le centre des boîtes de Petri.
4 La flamme du scalpel avec une lampe à alcool de laboratoire après plusieurs boutures pour le stériliser. Ajuster la température et le niveau d'humidité pour le type spécifique de champignons étant isolé. Observer les champignons comme il grandit sur dans le milieu du morceau. Couper et jeter toutes les zones colonisées par des champignons concurrents. Dump de la culture si la levure, les flaques d'eau de bactéries ou de moisissures noires et vertes prennent le relais. Identifier et purger les cultures de champignons de toute flore mixte indésirables.
5 Continuer d'isoler les champignons que vous voulez passer de la flore de contaminants. Découpez des triangles de gélose envahis par la culture de champignons pur dans les boîtes de Pétri. Choisissez sections loin de tout contaminant de croissance. Stab les triangles avec le scalpel et transférer chaque pièce à un nouveau plat d'agar. Pour ce faire, jusqu'à ce que les cultures de champignons isolés seulement purs sont de plus en plus observés.
Conseils et avertissements
- Gardez une bouteille d'alcool isopropylique de pulvérisation à portée de main et pulvériser toutes les surfaces de travail.
- Positivement identifier tout champignons vous isolez. Plusieurs espèces sont mortelles.