procédures de chimie et de biochimie dépendent souvent des réactions effectuées à un pH spécifique. De telles réactions bénéficient de l'utilisation d'une solution tampon, qui est un composé quantifié par sa résistance aux changements de pH lorsque soit des acides forts ou des bases y sont ajoutés. L'exécution de ces procédures nécessite une compréhension de mélange de solutions tampons ainsi que l'étalonnage et l'utilisation des pH-mètres.
Instructions
1 Sélectionner les sels de solution tampon avec la limite de pH correct pour la réaction. les protéines et les réactions individuelles ont des exigences spécifiques de pH. Les exigences sont explicitement énoncées dans le protocole de réaction, présenté dans la documentation accompagnant la protéine / échantillon ou enregistrée dans des volumes de référence que le Handbook of Chemistry and Physics. le pH Une solution tampon optimale devrait tomber aussi près que possible de l'unité de pH de la réaction et ne doit jamais dépasser ou moins 1 valeur de pH plus. les sels de solutions tampons sont disponibles en un paquet ou peuvent être mélangés à partir de composants premières suivant des recettes largement disponibles.
2 Verser la solution tampon dans un bêcher de 1 litre. Ajouter 1 litre d'eau distillée. Mettre un barreau d'agitation dans le bécher et placer le bécher sur une plaque d'agitation. Activer la plaque d'agitation à faible à réglage moyen. Remuer jusqu'à ce que pas de cristaux de solution tampon restent visibles.
3 Placer 100 ml bécher sous l'aiguille de test du pH-mètre. Nettoyez l'aiguille par pulvérisation avec de l'eau distillée. Le bêcher va attraper la course au large. Calibrer le pH-mètre en utilisant les solutions d'étalonnage. Nettoyez à nouveau l'aiguille. Éliminer le contenu de ruissellement capturés dans le bécher de 100 ml.
4 Amener le pH-mètre à la plaque d'agitation et de 1 litre bêcher. Introduire l'aiguille d'essai dans la solution tampon. Appuyez sur le bouton de calcul de l'indicateur de pH pour déterminer le pH de la solution. Si cette valeur est trop élevée ou trop faible, la solution nécessite les étapes supplémentaires suivantes.
5 Placez une pointe de micropipette frais sur la micropipette. Activez la plaque d'agitation à faible vitesse. Si le pH est trop élevé, utilisez le micropipetteur ajouter une goutte à la fois de l'acide chlorhydrique à la solution. Laisser la plaque d'agitation pour mélanger la solution et de mesurer le pH. Répétez le processus jusqu'à ce que le pH de la solution est la valeur nécessaire. Si le pH est trop bas, répéter cette étape à l'aide d'hydroxyde de sodium au lieu d'acide chlorhydrique.
Conseils et avertissements
- Toujours utiliser du matériel propre pour éviter l'introduction de bactéries ou d'autres contaminants dans votre solution.
- Les réactions ont souvent besoin d'un pH précis. Même une légère déviation peut entraîner une expérience qui a échoué.