Apicoplastes sont un type de intracellulaire organite présent dans les parasites unicellulaires qui causent des maladies graves telles que le paludisme, la toxoplasmose et la coccidiose. Organites sont des structures complexes à l'intérieur d'une cellule qui ne peut pas croître et de se reproduire elles-mêmes. Ils ont surgi quand un ancêtre des parasites englouti un autre organisme, qui a été probablement lié à des algues rouges. Parce que apicoplastes ne sont pas des cellules indépendantes, elles ne peuvent pas être cultivées dans une culture par eux-mêmes. Pour les cultiver il faut cultiver les parasites. Ce qui suit sont des instructions à la culture de l'étage de globules rouges de Plasmodium falciparum, ce qui provoque le paludisme.
Instructions
La mise en culture Plasmodium falciparum
1 Définir l'incubateur de cellules à 37 ° C et ajuster la composition du gaz à 1 pour cent d'oxygène, 3 pour cent de dioxyde de carbone et 96 pour cent d'azote.
2 Autoclave tous les équipements et matériaux non stérile.
3 Travailler dans la hotte à flux laminaire pour maintenir la stérilité, préparer le milieu final en ajoutant ce qui suit au milieu de culture RPMI 1640:
D-glucose à une concentration finale de 20 mM.
Hypoxantine à une concentration finale de 0,2 mM.
HEPES à une concentration finale de 25 mM.
le sulfate de gentamicine à une concentration finale de 25 mg / L.
Albumax II à une concentration finale de 0,5 pour cent p / v.
4 Distribuer la quantité totale de milieu fait à l'étape précédente en autant de flacons de culture comme souhaité et placez-les sur l'agitateur dans l'incubateur.
5 Une fois que le moyen a atteint 37 degrés Celsius, ajouter le parasite stock.
6 Changer le milieu de culture tous les jours pour garder les parasites bien nourris et vivants.
7 Ajouter des globules rouges tous les deux jours. Ils seront infectés par les nouveaux parasites qui sont générés dans la culture. Si elles deviennent trop nombreux pour un flacon, diviser son contenu en deux ou plusieurs autres petits.
Conseils et avertissements
- Si les flacons sont constamment ébranlées les parasites se reproduisent plus rapidement et tout en même temps. Ceci est un grand avantage quand vous voulez les récolter dans un but précis.
- Plasmodium falciparum et d'autres parasites sont responsables de millions de morts chaque année. Vous ne devriez jamais tenter de les cultiver dans la culture sauf si vous êtes un microbiologiste qualifié et avoir accès aux bonnes installations. Ceux-ci sont situés dans des endroits comme les universités, les laboratoires gouvernementaux et des sociétés de biotechnologie.