Les amorces sont utilisées dans la réaction en chaîne par polymérase appelée technique de laboratoire (PCR). Cette technique amplifie une petite quantité d'ADN à un nombre exponentiel. En utilisant l'amorce de PCR correct est essentiel pour le procédé d'amplification d'ADN.
Choisir PCR Primers
Le choix d'une amorce de PCR dépend de l'expérience exacte menée. Les outils logiciels sont disponibles pour aider à la conception d'amorce pour une expérience. Ces outils facilitent la conception d'amorce permettant aux chercheurs de trouver des amorces spécifiques nécessaires à leur expérience.
Conditions de réaction
Choisir le nombre de cycles de la PCR à exécuter, ainsi que la température et la durée de chaque cycle. Le nombre de cycles est subordonné à la quantité d'ADN cible il y a, ainsi que la quantité de produit de PCR amplifié est en cours. Le montant forfaitaire de cycles varient de 25 à 35.
ADN dénaturation
Avant que les amorces sont utilisées, l'ADN doit être dénaturé à un seul brin, au lieu de son double brin. Cela se fait par chauffage de l'ADN, à des températures supérieures à 90 degrés Celsius pendant 30 secondes.
annelage d'amorce
Après dénaturation de l'ADN est effectuée dans votre procédure PCR, hybridation des amorces doit par conduite. recuit Primer permet aux amorces de PCR pour trouver leurs cibles complémentaires et s'attachent. La température utilisée doit se coordonner avec la température de fusion de l'amorce utilisée.