Isoler les bactéries du sol est une première étape importante dans de nombreuses expériences de microbiologie. Une fois qu'ils sont isolés, les bactéries peuvent être analysés plus pour déterminer les choses, telles que leurs espèces et leur fonction dans l'environnement du sol. Même une petite quantité de sol peut contenir des millions de bactéries, ce qui rend nécessaire de diluer un échantillon de sol avant d'isoler les bactéries de l'échantillon.
Instructions
1 Mesurer 100 ml. l'eau distillée dans le cylindre gradué et l'ajouter au flacon stérile.
2 Peser 1 g de l'échantillon de sol et l'ajouter à la bouteille d'eau distillée. fermer hermétiquement la bouteille et secouer pour bien mélanger la solution.
3 Etiqueter les tubes stériles de test "10 ^ -3", "10 ^ -4", "10 ^ -5," et "10 ^ -6." Ajouter 9 ml d'eau distillée dans chacun des tubes, en utilisant une des pipettes.
4 Transfert 1 ml de la solution dans le flacon au tube marqué "10 ^ -3," en utilisant une nouvelle pipette. Boucher le tube et agiter doucement jusqu'à ce que la solution est bien mélangée.
5 Transfert 1 ml de la solution dans le "10 ^ -3" tube à essai à la "10 ^ -4" tube avec une nouvelle pipette. Cap le "10 ^ -4" tube et agiter pour mélanger. Répéter cette méthode pour transférer la solution de la "10 ^ -4" tube à "10 ^ -5" tube, puis du "10 ^ -5" tube à "10 ^ -6" tube.
6 Plate trois échantillons chacun de la "10 ^ -4," "10 ^ -5" et "10 ^ -6" tubes. Utiliser une nouvelle pipette pour transférer 1 ml de solution du tube dans une boîte de Pétri. Ajouter environ 15 ml de gélose nutritive à la plaque; puis mettre le couvercle sur la plaque et agiter doucement pour que l'agar recouvre le fond de la plaque.
7 Faire une plaque de commande en mettant 1 ml d'eau distillée dans une boîte de Pétri, en utilisant une nouvelle pipette. Ajouter l'agar; mettre le couvercle sur et agiter la plaque.
8 Laissez les boîtes de Pétri en position verticale jusqu'à ce que l'agar a fixé. Puis inverser les plaques et incuber --- soit dans un incubateur ou à la température ambiante --- pour aussi peu que 24 heures et jusqu'à cinq jours.
9 Retirer les plaques de l'incubateur après que la quantité souhaitée du temps d'incubation. Compter les colonies bactériennes sur des plaques contenant environ 30 à 300 colonies. Utilisez un marqueur permanent pour marquer les colonies que vous avez déjà compté afin d'éviter de compter les mêmes colonies deux fois.
dix Diviser le nombre de colonies comptées par la dilution --- "10 ^ -4," "10 ^ -5" ou "10 ^ -6" --- de la solution du sol pour chaque plaque. Trouver le nombre de bactéries cultivables dans le programme original du sol par la moyenne des résultats de chaque plaque dénombrable.