But de Stain Gel ADN dans un laboratoire Elecrophoresis

March 24

But de Stain Gel ADN dans un laboratoire Elecrophoresis


Lorsque vous exécutez l'ADN sur gel d'agarose dans un laboratoire, le gel est incolore et translucide comme une dalle de jello clair, et à moins que vous tacher, vous ne sera pas en mesure de voir votre ADN. colorants spéciaux tels que le bromure d'éthidium faire vos bandes d'ADN visible de sorte qu'ils se détachent sur le fond, et vous pouvez utiliser l'emplacement des bandes pour analyser vos résultats.

Colorants

Le bromure d'éthidium est le colorant le plus commun pour la coloration des gels d'électrophorèse d'ADN. Il s'insère entre les deux brins des molécules d'ADN dans votre échantillon. Malheureusement, il peut se glisser entre les brins non seulement dans votre échantillon, mais dans vos cellules aussi bien, donc il doit être manipulé avec soin; porter des gants doubles est une précaution d'usage. Ces dernières années ont vu l'introduction de produits chimiques alternatifs comme SYBR Safe ainsi.

Fluorescence

Une fois que vous avez ajouté votre teinture, il va se lier à l'ADN dans l'échantillon, l'amenant à devenir fortement fluorescent. Placer le gel sous une lumière noire et les bandes d'ADN seront brillent brillamment, ce qui contraste vif à l'arrière-plan. Le colorant permet de voir les bandes d'ADN sur le gel, qui autrement serait invisible pour vous. Il est essentiel de vous abstenir de regarder ou dans la lumière noire tout en regardant le gel, car l'UV pourrait gravement endommager vos yeux.

Une analyse

Les techniciens de laboratoire prennent généralement des images du gel avec un appareil photo numérique; à ce stade, ils peuvent jeter le gel et enregistrer l'image sur un disque dur de l'examiner plus tard. Vous pouvez glaner beaucoup d'informations à partir de la position et types de bandes que vous voyez. Si vous avez exécuté des marqueurs de taille sur le gel, en plus de l'échantillon, par exemple, vous pouvez obtenir une estimation approximative de la taille de vos molécules d'ADN et le nombre de paires de bases qu'ils contiennent.

Autres caractéristiques

Si vous avez utilisé un type spécial de protéines pour couper un morceau d'ADN, vous pouvez l'exécuter sur un gel et vérifier plusieurs bandes dans la même voie pour vous assurer que l'enzyme de restriction a travaillé. Sinon, si vous travaillez avec de petites boucles d'ADN appelés plasmides, et vous voulez vous assurer un plasmide contient un segment que vous avez inséré dedans, vous pouvez le couper avec une protéine spéciale et l'exécuter sur un gel pour vous assurer que le segment était présent.