L'absorption se réfère à la réduction de l'intensité de la lumière lorsqu'elle passe à travers la solution d'une substance. Un instrument appelé spectrophotomètre permet de mesurer expérimentalement l'absorption de la solution placée dans une cuvette. La loi de Beer-Lambert détermine la relation entre la concentration et l' absorption, exprimée en absorption = (coefficient d'extinction molaire)
(Longueur du trajet) (concentration). Le coefficient d'extinction molaire est une caractéristique d'une substance - une protéine, par exemple - qui indique la quantité de composé absorbant la lumière. La longueur du trajet correspond à la largeur de la cuvette.
Instructions
1 Diviser la valeur d'absorption de la longueur du trajet. Une cuvette standard a une longueur de chemin, ou la largeur, de 1 centimètre (cm). Par exemple, si l'absorption est 0,24, puis 0,24 / 1 = 0,24.
2 Diviser la valeur obtenue à l'étape précédente du coefficient d'extinction molaire pour calculer la concentration molaire d'un composé. Par exemple, si le coefficient d'extinction molaire est de 480, la concentration est de 0,24 / 480 = 0,0005 mole par litre (L).
3 Multiplier la concentration molaire de la masse moléculaire du composé pour calculer la concentration en g / L unités. Par exemple, si le composé a une masse moléculaire de 750 g / mol, puis 0,0005 mol / L * 750 g / mol = 0,375 g / l.
Conseils et avertissements
- coefficients d'extinction Molar pour de nombreuses substances (y compris les protéines) sont totalisées et peuvent être trouvés facilement en ligne.
- Pour les protéines, ce paramètre peut également être calculée en se basant sur la séquence protéique d'acides aminés en utilisant des outils en ligne.