Comment faire une spectrophotométrie sur Sulfate de cuivre

May 8

Comment faire une spectrophotométrie sur Sulfate de cuivre


Anhydres (sans eau) de cuivre (II) sulfate est gris-blanc en couleur, mais le cuivre plus fréquent (II) pentahydrate sulfate est une belle nuance de bleu clair, et le sulfate de cuivre (II) dissous dans l'eau forme une solution bleue. C'est parce qu'il absorbe la lumière dans la région rouge-orange du spectre, de sorte que vos yeux perçoivent comme étant bleu. Vous pouvez utiliser un spectrophotomètre pour trouver la longueur d'onde d'absorption maximale de sulfate de cuivre (II), puis déterminer la concentration d'une solution inconnue.

Instructions

1 Allumez le Spec20; il a besoin de se réchauffer pendant au moins un quart d'heure avant de l'utiliser.

2 Enfilez vos gants, manteau et lunettes de laboratoire, et ne les supprime pas pour le reste de la procédure. Vous devez toujours porter des chaussures fermées doigts lorsque l'on travaille dans un laboratoire.

3 Prenez cinq de vos tubes à essai et les étiqueter comme Std 1, Std 2, Std 3, etc. Ajouter les quantités suivantes de 0,050 M de cuivre (II) solution mère sulfate et dH2O à chaque:

Std 1: Ajouter 10 ml de cuivre (II) Stock sulfate

Std 2: Ajouter 8 ml de cuivre (II) disponible sulfate et 2 mL dH2O

Std 3: Ajouter 6 mL de cuivre (II) disponible sulfate et 4 ml dH2O

Std 4: Ajouter 4 ml de cuivre (II) disponible sulfate et 6 mL dH2O

Std 5: Ajouter 2 mL de cuivre (II) disponible sulfate et 8 ml dH2O

4 Prenez les cinq autres tubes à essai et les étiqueter comme ukn 1, ukn 2, ukn 3, etc. Ces tubes contiendront des solutions de votre échantillon ou inconnue, la solution dont la concentration que vous espérez pour déterminer diluée. Ajouter les montants suivants à chacun:

Ukn 1: Ajouter 10 ml de solution inconnue

Ukn 2: Ajouter 8 mL inconnue et 2 mL dH2O

Ukn 3: Ajouter 6 mL inconnu et 4 ml dH2O

Ukn 4: Ajouter 4 ml inconnu et 6 mL dH2O

Ukn 5: Ajouter 2 mL inconnu et 8 ml dH2O

5 Fermez le couvercle sur la cuvette. Avec le couvercle fermé et la longueur d'onde fixée à 400 nm, le% T devrait être 0. Dans le cas contraire, l'ajuster avec le bouton sur la droite afin qu'il indique zéro.

6 Ajouter dH2O à la cuvette jusqu'à ce qu'elle atteigne la ligne de remplissage, puis insérez la cuvette dans le Spec20. Maintenant, vérifier le% T. Il devrait être 100%. Dans le cas contraire, régler le% T jusqu'à ce qu'il soit exactement 100 en utilisant le bouton sur la droite, puis retirez la cuvette et revérifier que le% T sans cuvette inséré est toujours 0.

7 Prenez le tube Std 1 d'essai (qui contient 10 ml de cuivre (II) du stock de sulfate) et de transférer son contenu à la deuxième cuvette. Couvrir la seconde cuvette avec du parafilm et l'inverser pour mélanger, puis retirez le parafilm et essuyer la cuvette avec un kimwipe pour nettoyer sa surface. Insérez la cuvette dans le Spec 20. Commencez avec la longueur d'onde à 400 nm et enregistrer le% T.

8 Changer la longueur d'onde par incréments de 20 nm (420 nm, 440 nm, 460 nm et ainsi de suite) et zéro le spectrophotomètre à chaque longueur d'onde (ie revérifier que% T pour un spectrophotomètre vide est 0, tandis que% T pour la première cuvette, qui ne contient que de l'eau pure, est de 100%). Insérez la seconde cuvette (celle contenant le cuivre (II) de la solution mère de sulfate) et enregistrer le% T à chaque point. Notez ces valeurs dans un tableau sur une feuille de papier. Arrêtez une fois que vous atteignez 660 nm.

9 Déterminer quelle longueur d'onde correspond à% le plus bas T. Ceci est l'absorption maximale. Définir le spectrophotomètre à cette longueur d'onde.

dix Re-vérifier le calibrage (c.-à-% T devrait être encore 0 lorsque le couvercle est fermé et le spectrophotomètre est vide, et% T pour l'eau pure devrait encore être à 100%).

11 Notez le% T pour Std. 1, puis vider et nettoyer la cuvette. Transférer le contenu du Std. 2 à la cuvette et répéter la mesure pour Std. 2. Notez que vous n'avez pas besoin de revérifier le calibrage entre chacune de ces mesures.

12 Mesurer% T pour chacun des 10 solutions que vous avez préparées.

13 Nettoyez votre espace de travail, puis retirez vos lunettes et des gants.

14 Transférez vos données pour les solutions Std à un programme de feuille de calcul de l'ordinateur. Pour chaque solution Std, entrez la concentration de cette solution et le% T que vous avez enregistré.

15 Demandez le programme tableur convertir% T en absorbance pour vous. Vous pouvez le faire en invitant le programme de feuille de calcul pour appliquer la formule suivante: Absorbance = log (100% /% T). La manière précise que vous entrez cette formule sera probablement dépendra du programme de feuille de calcul que vous utilisez; consulter le manuel / page d'aide de l'utilisateur pour plus de détails.

16 Charger le programme de tableur pour représenter graphiquement l'absorbance versus la concentration, avec une concentration sur l'axe des x et l'absorbance en ordonnée. Ensuite, charger le programme de feuille de calcul pour tenir une équation à ces données en utilisant une régression linéaire.

17 Utilisation du programme de tableur, convertir le% T pour tous vos échantillons ukn à l'absorbance. Trouvez au moins 3 qui ont des valeurs d'absorbance dans la même gamme que les solutions Std.

18 Calculer la concentration de cuivre (II) sulfate dans chacune des solutions diluées ukn en branchant l'absorbance pour chaque dans l'équation dérivée par votre programme de feuille de calcul. Comme il est une équation linéaire, cela devrait être un calcul assez simple, mais vous pouvez toujours utiliser le programme de feuille de calcul pour le faire pour vous si besoin est.

19 Utilisez la concentration que vous avez calculé pour chacune des trois solutions ukn que vous avez utilisées pour déterminer la concentration initiale de l'inconnu non dilué. Ukn 1, par exemple, est non dilué, de sorte que sa concentration est la même que celle de la solution inconnue d'origine. Ukn 2, cependant, contient 8 ml d'inconnu et 2 ml d'eau, de sorte que vous pourriez trouver la concentration de la solution non diluée originale de ukn 2 en divisant par 0,8. Pour ukn 3, vous divisez par 0,6 pour ukn 4 de 0,4, et ukn 5 de 0,2.

20 Moyenne vos trois résultats pour vous donner la concentration de votre cuivre (II) de l'échantillon de solution de sulfate.

Conseils et avertissements

  • Cuivre (II) pentahydrate sulfate est un irritant pour les yeux et la peau possible.