Solutions tampons résister aux changements de pH, car ils contiennent des conjugués acide-base faibles qui neutralisent les ions H + et OH-. Les solutions tampons sont constitués d'acides ou de bases faibles, et le sel de cet acide ou une base. La sélection d'un système tampon approprié dépend de la plage de pH pour la mise en mémoire tampon. La plupart des réactions biologiques se produisent à un intervalle de pH de 6 à 8. Les tampons d'un tampon de phosphate sur la plage de pH de 6,5 à 7,5. des tampons d'acides carboxyliques sont utiles de pH de 3 à 6. tampons borates fonction du pH de 8,5 à 10. Les tampons d'acides aminés tels que la glycine et l'histidine effectuer sur une diversité de gammes de pH. tampon Tris est l'un des systèmes les tampons les plus couramment utilisés dans les laboratoires de biologie. Les calculs pour une solution de tampon Tris seront utilisés dans l'exemple suivant, mais la méthodologie applique à toute solution tampon.
Instructions
1 Utiliser le produit de la molarité de la solution finale et le volume pour déterminer moles de base requise. Par exemple, si 2 litres d'une solution de tampon Tris 0,1 M, est nécessaire, alors le nombre de moles de Tris nécessaire est la suivante:
0,1 mole / litre x 2 litres = 0,2 moles de base Tris
2 Calculer la masse de mémoire tampon requise en multipliant le nombre de moles requis par le poids moléculaire de la base. Par exemple, la masse de 0,2 mole de Tris base est égale à:
0,2 mole de Tris x 121.1 g / mole Tris = 24,22 g de Tris
3 Mesurer la masse appropriée de la base sur une échelle.
4 Dissoudre la base dans de l'eau distillée en utilisant une barre d'agitation magnétique et en agitant la plaque chaude. Dissoudre dans un volume d'eau légèrement inférieur au volume de la solution finale (950 à 975 mL pour chaque litre de solution finale). Le pH du tampon Tris change avec la concentration et a besoin d'un réajustement si elle est trop petite un volume initial est utilisé. Il est également préférable de préparer le tampon à la même température, il sera utilisé au cours de l'essai ou de l'expérience que le Tris a de grandes variations dépendant de la température du pH.
5 Titrer la solution aqueuse de Tris avec de l'acide chlorhydrique 1 M en utilisant un pH-mètre.
6 Porter la solution à son volume final avec de l'eau distillée dans une fiole jaugée.
Conseils et avertissements
- Pour gagner du temps lors de la préparation d'une solution tampon, vous pouvez utiliser un tampon premade se concentre au pH requis et diluer pour molarité désirée et solution tampon volume.Prepare à la même température, il sera utilisé pour éviter pH significative le temps de changes.Avoid consommer des ajustements de pH, titrer seulement après dilution à la concentration désirée. Dissoudre dans un volume trop petit va conduire à des titrages répétés.
- Faites preuve de prudence lors de la manipulation des acides et des lunettes de protection bases.Wear.