De nombreuses réactions biochimiques sont naturellement lente, à moins catalysées par des enzymes qui augmentent leur vitesse de réaction. cinétique enzymatique mesure la vitesse de réaction substrat enzymatique unique en utilisant l'équation de Michaelis-Menten, v = [S] Vmax / [S] km. L'équation de Michaelis-Menten, nommé d'après le biochimiste Leonor Michaelis et le médecin Maud Menten, "décrit la relation entre le taux de conversion du substrat par une enzyme (V) et la concentration du substrat ([S])," selon le Collège Davidson site web de la chimie. Sur la base de cette équation, la courbe de Michaelis-Menten peut être tracée sur l'axe des x représente [S] en millimoles et l'axe des ordonnées représentant V en secondes / micromole.
Instructions
Comprendre l'équation de Michaelis-Menten
1 Comprendre le but de chaque valeur dans l'équation et ce qu'elle représente. V est le taux de conversion ou la vitesse de réaction, [S] est la concentration du substrat, Vmax est le taux de conversion maximal, et Km (la constante de Michaelis) est la concentration du substrat au cours de laquelle le taux de conversion est la moitié de Vmax.
2 Trouver les valeurs pour chaque variable dans l'équation. [S] est la concentration connue pour le substrat en cours d'analyse et la modification de cette valeur aura une incidence sur la vitesse de la réaction catalysée par une enzyme. Les valeurs Km et Vmax sont habituellement répertoriés avec le substrat aussi bien en termes de millimoles et sec-1 lorsqu'il est administré dans un problème.
3 Résoudre l'équation appropriée pour chaque valeur si les valeurs ne sont pas donnés. Selon le site Mills College Biochimie, commencer par l'équation d'état k1 constante [efree] [S] = (k-1 + k2) [ES]. Définir Km en utilisant l'équation Km-1 = k1 / (k-1 + k2). Résoudre pour [ES] en utilisant l'équation [ES] = [S] [Et] / (Km + [S]) pour obtenir [Ef] et [S]. Utilisez [Ef] pour définir Vmax en utilisant l'équation vmax = kcat [Et]. Consulter un guide ou un manuel de biochimie de niveau collégial pour obtenir des instructions détaillées sur la façon de résoudre chacun de ces équations et définitions spécifiques de chaque variable.
4 Insérer Km, [S] et Vmax dans l'équation de Michaelis-Menten et résoudre pour V, la vitesse ou la vitesse de réaction.
Tracé de la courbe de Michaelis-Menten
5 L'utilisation de papier graphique, dessiner un x et y axe. Étiqueter l'axe x mM de [S] ou la concentration du substrat. Etiqueter le AX- sec / micro-molaire y de V ou de la vitesse de réaction.
6 Insérez des valeurs différentes de [S] dans l'équation de Michaelis-Menten, ainsi que les valeurs trouvées pour Km et Vmax, à résoudre pour V.
7 Tracer les valeurs pour [S] sur l'axe des x et les valeurs correspondantes pour résoudre V sur l'axe-y. Le graphique devrait ressembler à une hyperbole rectangulaire où des concentrations plus élevées de substrat équivalent à des réactions enzymatiques plus rapide.