Les chercheurs biomédicaux et les laboratoires médicaux trouvent souvent qu'il est nécessaire de déterminer si une protéine donnée est présente dans un échantillon. Transfert de Western est une technique qui offre un moyen pour détecter la présence d'une protéine dans un échantillon de tissu ou d'extrait.
Caractéristiques
En Western blot, les protéines provenant d'un échantillon sont séparés en fonction de leur taille et de la charge à travers une électrophorèse sur gel de technique appelée. Les protéines sont ensuite transférées sur une membrane de nitrocellulose et une solution contenant un anticorps est ajouté. L'anticorps est spécifique et ne se lier à la protéine d'intérêt. Ensuite, une solution contenant un deuxième anticorps spécifique pour le premier anticorps est ajouté. Le second anticorps est marqué avec un isotope radioactif, de sorte que si la protéine d'intérêt est dans l'échantillon, le marqueur radioactif marquera sa présence.
Fonction
Western blot est utilisé dans la recherche scientifique et le diagnostic médical. En médecine, il peut être utilisé pour tester la maladie de Lyme ou le VIH dans des échantillons de sang. Dans la recherche, il est souvent utilisé pour déterminer si une protéine particulière est présente dans un type cellulaire donné et la quantité de la protéine peuvent être présents.
Considérations
Pour des examens médicaux, comme la maladie de Lyme, le transfert de Western est utilisé conjointement avec une technique appelée technique ELISA (dosage immuno-enzymatique). ELISA peut parfois donner des résultats faussement positifs. Western blot permet de confirmer les résultats des tests ELISA.