Les biologistes ont souvent besoin d'étudier certains organites d'une cellule - les mitochondries d'une cellule humaine ou les chloroplastes d'une cellule d'algues ou de plantes, par exemple. Isoler ces organites implique une variété de procédures appelées collectivement un fractionnement cellulaire. En tant que méthode pour l'étude de processus au sein d'organites, le fractionnement cellulaire présente des avantages et des inconvénients.
Isolement
Avec fractionnement cellulaire, les biologistes peuvent isoler ou purifier des organites spécifiques pour une étude plus approfondie. Ils peuvent réaliser des expériences avec des échantillons purs de ces organites qui serait impossible ou plus difficile avec la cellule entière intacte. Les mitochondries, par exemple, pourrait être purifié pour une utilisation dans les essais d'expériences comment certains composés affectent la chaîne de transport d'électrons ou la phosphorylation oxydative (ces deux font partie du processus qui stocke l'énergie récoltée à partir du glucose sous une forme utile à la cellule).
Fiabilité
Des méthodes fiables ont été développés pour isoler certains types d'organelles de cellules. Typiquement, un homogénat ou un mélange est préparé à partir d'un échantillon de tissu. Le broyât est un peu comme une soupe préparée en brisant ouvertes toutes les cellules de sorte que leur contenu deviennent mêlés. Ensuite, l'homogénat est centrifugé, filé dans un tube à essai ou un tube de centrifugeuse dans une machine avec un rotor tourbillonnant qui jette le contenu de chaque tube vers l'extérieur. Ce procédé sépare le contenu sur la base de leur densité. En faisant varier la vitesse de la centrifugeuse ou de la durée pendant laquelle le contenu est centrifugée, les scientifiques peuvent extraire un échantillon des organites qu'ils veulent étudier.
la mort cellulaire
Préparation d'un homogénat entraîne nécessairement tuer les cellules. Dans de nombreux cas, cela peut ne pas être un inconvénient; si un scientifique tente d'étudier organites au sein de la cellule, la mort de la cellule est sans importance. D'autre part, une fois que les cellules sont mortes, il est impossible de regarder les événements qui devraient normalement se produire dans une cellule vivante en temps réel. Les scientifiques utilisent souvent d'autres techniques, comme l'étiquetage avec une protéine fluorescente, pour suivre ce qui se passe dans les cellules vivantes.
Temps
Comme beaucoup de procédures dans les laboratoires biologiques, le fractionnement cellulaire est un peu de temps. Les échantillons doivent être filées dans la centrifugeuse pour une assez longue période de temps pour obtenir une bonne séparation; En outre, ils doivent souvent être filées plusieurs fois, en fonction de l'organite que vous essayez d'isoler. Après chaque centrifugation, le surnageant (liquide au-dessus des débris sédimentée ou précipiter dans le tube de centrifugation) doit être décanté sans déverser le précipité et le précipité doit être remis en suspension si elle contient le composant d'intérêt.