Étapes d'extraction d'ADN

July 20

Étapes d'extraction d'ADN

Les bases

ADN (acide désoxyribonucléique) extraction est un processus avec de nombreuses applications scientifiques vitales. Dans la recherche et de la médecine, ses utilisations comprennent le séquençage de l'ADN, la détection des virus et des bactéries, et l'étude des maladies et des troubles d'origine génétique. Dans le domaine de la science médico-légale, il est utilisé pour l'identification des morts et des vivants, ainsi que pour l'analyse de la scène du crime. Malgré ses résultats sophistiqués, l'extraction de l'ADN lui-même est en fait assez simple, et les techniques de base d'extraction fonctionne aussi bien dans un laboratoire de recherche ou à la maison.

extraction de l'ADN commence par l'acquisition d'un échantillon d'ADN. Comme tous les organismes vivants contiennent de l'ADN, les options d'échantillons disponibles sont pratiquement infinies, et le choix se rapporte généralement directement au sujet à l'étude. L'ADN humain est facilement obtenu en tamponnant l'intérieur de la joue d'une personne avec un coton-tige. Des échantillons de plantes peuvent être obtenues par découpe d'une partie de la matière source.

Extraction dans le laboratoire

Une fois qu'un échantillon est obtenu, il doit être ventilé afin d'obtenir le matériel génétique à l'intérieur des cellules individuelles. Dans le laboratoire, un échantillon est généralement placé dans un dispositif appelé un tube Eppendorf. Une solution particulière est ensuite ajouté au tube et le tube est placé dans un bain d'eau chaude. Le but de la solution consiste à lyser (décomposer) structure cellulaire du matériau. Il contient deux ingrédients clés: un détergent spécialement conçu et une enzyme appelée protéinase K. Une fois dans le bain d'eau chaude, le détergent ronge la membrane cellulaire de l'échantillon ainsi que la membrane nucléaire entourant le matériel génétique de la cellule. Une fois que ces membranes sont rompues, la proteinase K se désagrège une protéine appelée histone, qui est enroulé autour de l'ADN.

Le tube Eppendorf est ensuite retiré du bain d'eau, et une solution de sel concentrée est ajoutée à agglomérer les protéines non désirées et les débris cellulaires. Le tube est ensuite placé dans une centrifugeuse de petite taille, où la force centrifuge quitte l'ADN diffusée dans une couche de solution au-dessus de l'excès de matériau plus lourd. L'ADN est ensuite retiré et placé lui-même dans un autre tube. L'alcool isopropylique est ajouté à l'ADN et on mélange soigneusement. Ce procédé oblige l'ADN hors de la solution, agglomérante en brins visibles. Le matériau est ensuite soumis à la centrifugeuse une fois de plus pour forcer les brins d'ADN ensemble. On élimine l'alcool et l'ADN est autorisé à sécher. Une fois que ce processus est terminé, l'échantillon d'ADN ainsi obtenu peut être stocké et utilisé pour l'un de ses nombreux objectifs.

Extraction à la maison

Le même processus d'extraction de base peut être effectuée à la maison, en utilisant les fruits, les légumes ou la viande. Le matériau choisi est placé dans un mixeur domestique avec de l'eau froide et le sel de table. Une fois ces éléments sont mélangés ensemble, la suspension résultante est tendue dans un autre récipient. Le détergent liquide est ensuite ajouté, et ce mélange est placé dans un tube à essai et on laisse reposer pendant un certain temps. Puis attendrisseur de viande ou de jus d'ananas est ajouté pour fournir des enzymes nécessaires. La dernière étape est l'addition d'alcool, ce qui oblige l'ADN à agglomérer en brins qui peuvent être tirées à partir du tube d'essai de frottement.