Méthodes d'essai d'ADN

June 22

analyse de l'ADN est le procédé d'utilisation de l'ADN pour faciliter l'identification des individus. Alors que 99,9 pour cent des séquences d'ADN humain sont les mêmes, les scientifiques sont capables d'utiliser des séquences répétées dans l'ADN pour distinguer les individus les uns des autres puisque cette information est toujours différente. des tests ADN est également connu comme le profilage de l'ADN, l'ADN dactylographie ou des empreintes génétiques et peut être utilisé pour relier des suspects à des crimes, établir la paternité ou la maternité, de prouver les liens du sang ou de déterminer les racines généalogiques.

Méthodes d'essai d'ADN

test de fond

La clé fondamentale des tests d'ADN consiste à trouver des différences de séquences d'ADN spécifiques. Deux ensembles d'ADN sont nécessaires pour la comparaison. En médecine légale, par exemple, ce sont souvent les échantillons d'ADN de la scène du crime par rapport à l'ADN d'un suspect. La première étape de l'essai peut varier selon différentes techniques (décrites dans les sections ci-après), mais est essentiellement l'isolement d'une partie d'une séquence d'ADN. Les fragments d'ADN coupé sont ensuite triées selon leur taille par électrophorèse sur gel. Un transfert du gel est conçu pour enregistrer les résultats du gel et une sonde est libérée sur la tache pour trouver et se fixer sur une séquence d'ADN similaire à celui associé à la sonde.

Restriction Fragment Length Polymorphism

Restriction Fragment Length Polymorphism (PLFR) est une technique d'isolement de l'ADN qui est souvent utilisé en médecine légale. En règle générale, RFLP nécessite de grandes quantités d'ADN non dégradé, il est donc idéal pour les scènes de crime qui sont nouvelles avec beaucoup de preuves. Une fois que suffisamment d'échantillons sont obtenus, des enzymes de restriction sont utilisées sur l'ADN pour isoler une séquence connue sous le nom AATT. Les fragments sont alors soumis à une électrophorèse sur gel, fabriqué dans un buvardage et sondé (comme mentionné ci-dessus). Les tailles des fragments d'ADN trouvés par la sonde sont analysés et les résultats de chaque échantillon d'ADN sont comparés. Un match peut être déclaré si les bandes sont tous à moins de 5 pour cent d'une autre taille.

Polymerase Chain Reaction

réaction en chaîne par polymérase (PCR) est une autre technique d'amplification de l'ADN couramment utilisée en médecine légale. Contrairement à RFLP, PCR a la capacité d'utiliser des informations provenant de très petites et même dégradées échantillons en amplifiant considérablement les régions spécifiques de l'ADN. PCR utilise deux courts morceaux d'ADN connu comme amorces d'oligonucléotides et une ADN polymérase thermostable pour isoler la région de l'ADN à copier. Les échantillons d'ADN isolés sont ensuite exécutés sous électrophorèse sur gel et buvardés comme avec RFLP pour l'analyse et la comparaison. Il convient de noter que la contamination de l'échantillon d'ADN est d'une importance particulière dans l'analyse par PCR. Si un autre type de l'ADN provenant soit d'autres personnes ou des choses telles que les bactéries sont présentes, de nombreuses copies des fragments d'ADN isolés peuvent être fabriqués à partir de la mauvaise source et donnent des résultats erronés.

Importance du court Tandem Repeats

répétitions en tandem courtes (STR) sont de petites régions de courtes séquences répétées de l'ADN qui varient considérablement entre les individus non apparentés. Seulement 5 à 20 pour cent des individus partagent les mêmes séquences répétées, de sorte que l'identification de cette région en particulier est très utile dans l'identification des personnes. Plus les régions qui sont isolées et testées, plus précises seront les résultats. STR est souvent isolée par PCR en raison d'effets amplification de la PCR.

AmpFLP

Amplified Fragment Length Polymorphism (AmpFLP) est une technique qui repose sur des variables répétitions en tandem en nombre (VNTR) pour distinguer les allèles, qui sont les différentes formes d'un gène. PCR est utilisée pour amplifier des échantillons d'ADN qui sont ensuite exécutés sur un gel de polyacrylamide pour séparer les allèles plutôt que par la taille comme d'autres tests font. Ce test particulier est hautement automatisé et à faible coût, il est assez populaire dans les pays à faible revenu.

Multiplex STR

Mutliplex STR est un test STR couramment rencontré qui utilise plusieurs PCR dans une réaction pour tester divers fragments en même temps. Cette forme de test est conçu pour isoler STR avec différentes tailles de STR qui se chevauchent tailles en appliquant des colorants différents pour les distinguer les uns des autres. Le test utilise également des tubes capillaires et electroferograms au lieu d'une électrophorèse sur gel pour séparer les fragments d'ADN. L'avantage de ce type de test est la rapidité des résultats par rapport à d'autres types de tests. Cependant, multiplex STR est assez nouveau et peut être soumis à la surinterprétation lorsque les profils partiels sont utilisés.