analyse de l'ADN a prouvé être un progrès scientifique incroyablement utile, mais il est loin d'être un champ facile d'étude. Il existe de nombreuses façons d'analyser l'ADN, chacun avec ses propres protocoles et techniques. Un tel procédé d'analyse de l'ADN est amplifié ribosomique analyse de restriction de l'ADN, en abrégé ARDRA.
Polymerase Chain Reaction
ARDRA commence par une réaction en chaîne par polymérase (PCR) de l'ADN à étudier. PCR est une méthode utilisée pour amplifier ou multiplier, un seul brin de l'ADN millions de fois afin d'étudier certaines caractéristiques. Pour résumer le processus, un brin d'ADN - amorce - est mêlé à une ADN polymérase, une enzyme qui permet à l'ADN de répliquer quand il est chauffé et refroidi pendant le cycle thermique. Le cycle crée une réaction en chaîne qui produit de nombreux brins identiques. Le brin d'ADN doit être amplifié à au moins 1000 paires de bases (pb).
Agarose Gel Electrophoresis
L'étape suivante dans le processus de ARDRA est appelée électrophorèse sur gel d'agarose. Elle est réalisée de sorte que les fragments d'ADN provenant de l'étape de PCR ont toutes la même taille et d'éliminer ceux qui ne sont pas conformes. gel Agarose est un composé spécial qui permet aux scientifiques de séparer les protéines d'ADN plus facilement. Un courant électrique est envoyé à travers le gel, qui est imprégné de l'ADN provenant de la PCR. Les fragments d'ADN alignés selon la longueur, et les scientifiques peuvent sélectionner les longueurs de fragments dont ils ont besoin.
Digestion
La digestion est l'étape dans laquelle les fragments d'ADN sont soumis à l'action d'une enzyme de restriction. L'enzyme de restriction coupe l'ADN au niveau des sites de restriction spécifiques. Ceci est probablement le plus compliqué, mais le plus important, étape dans le processus. L'échantillon d'ADN doit être suffisamment assez grand pour permettre des erreurs ou anomalies dans le processus de coupe d'enzyme de restriction. Le processus de la digestion dure plusieurs heures, pendant laquelle l'échantillon d'ADN doit être mis à incuber à 37 ° C (98,6 degrés Fahrenheit).
Une analyse
La dernière étape après digestion dans le protocole de ARDRA consiste à effectuer une deuxième électrophorèse sur gel d'agarose afin d'aligner à nouveau et on sépare les brins d'ADN pour l'analyse. Une fois que cela a été fait, l'ADN peut être analysé pour les informations scientifiques veulent trouver. L'analyse peut être effectuée visuellement ou à l'aide d'un logiciel d'analyse.