Un spectrophotomètre est un instrument utilisé dans la biologie et la chimie. Le spectrophotomètre fonctionne en transmettant une longueur d'onde spécifique à travers un échantillon sur une mesure de la lumière. Les propriétés contenues dans l'échantillon peuvent être déterminées par la longueur d'onde. Etant donné que différents composés absorbent la lumière à différentes longueurs d'onde, le spectrophotomètre permet à un utilisateur de déterminer les différents composés dans une solution par une analyse des longueurs d'onde résultantes absorbées.
Instructions
1 Placer la solution contenant les composants à déterminer dans des cuvettes. Tournez le spectrophotomètre à la position «On». Lisez les instructions pour l'instrument pour vous assurer que l'appareil est calibré. Entrez la longueur d'onde souhaitée (par exemple 500). Certains spectrophotomètres exigent de tourner un bouton à la longueur d'onde souhaitée.
2 Assurez-vous que vos tubes ou cuvettes contenant les solutions test sont propres. Essuyer avec un Kimwipe si nécessaire. Placer la solution vierge dans le compartiment. Fermez le compartiment et appuyez sur le bouton "Auto Zero". Retirez le cache. Créer des courbes d'étalonnage pour déterminer la concentration du composé dans la solution. Des courbes d'étalonnage sont créées en faisant des dilutions d'une concentration connue. Les résultats d'absorption sont mesurés à une longueur d'onde spécifique, puis tracées sur un graphique.
3 Introduire la solution d'échantillon dans le compartiment. Lire et enregistrer les résultats d'absorbance. Répétez au moins trois fois pour un niveau d'absorbance moyenne. Tracer un graphique avec les résultats de l'absorbance en fonction de longueur d'onde en utilisant la courbe standard. Tracer la lecture d'absorbance moyenne de vos résultats. Tracer une ligne droite à l'axe pour obtenir la concentration de votre échantillon. La concentration de votre échantillon déterminera les composés présents.